金氏金氏菌PCR检测试剂盒具有下列特点: 1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。 2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。 3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 正常大鼠肾细胞;NRK 大鼠肝细胞;BRL 3A 大鼠骨骼肌成肌细胞;L6 大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1) 大鼠雪旺细胞;RSC96 大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5 正常大鼠肾细胞;NRK-52E 大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 大鼠肝细胞;BRL 3A 大鼠脑胶质瘤细胞;C6 大鼠肝癌细胞;CBRH-7919 [CBRH7919] 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] 大鼠肝癌细胞;RH-35 大鼠化的癌细胞;SHZ-88 大鼠胰腺外分泌腺肿瘤细胞;AR42J 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化);PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化);PC-12(高分化) 大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106 大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3 大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] 正常大鼠肾细胞;NRK 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E 大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1 大鼠化的癌细胞;MADB106 大鼠胰腺外分泌腺肿瘤细胞;AR42J 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1 金氏金氏菌PCR检测试剂盒大鼠纤维母细胞;1/EJ 1-1 黄胸鼠肺成纤维细胞;YCR 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] 黑化大家鼠肺成纤维细胞;NRm |