试剂和样本的控制方法： 一、试剂 1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照进行，已获得国家承认的“三证"，每一个产品都有对应的批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。 2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。 二、样本 1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等； 类风湿因子的控制方法： ①用F(ab)2替代完整的IgG； ②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理； ③检测抗原时，可用试剂盒
商品属性： 产品名称：鸡热休克蛋白20(HSP-20)elisa试剂盒
英文名称：Chicken Heat Shock Protein 20, HSP-20 Elisa Kit
使用：本试剂仅供科研使用 保存：2-8℃ 有效期：6个月 检测方法：ELISA 产品性状：96T/48T，盒装液体 贮藏条件：2-8°C 产品主要成分：酶标板,试剂,标准品等。 种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。 标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
试剂盒组成： 1 | 20 倍浓缩洗涤液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 | 2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品（270ng/L） | 0.5ml×1 瓶 | 3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 | 4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 | 5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 | 6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
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样本要求： 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。 2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 2400 ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 | 1200ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 | 600ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 | 300ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 | 150ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
操作流程： （1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 （2）酶标板置4℃，包被过夜。 （3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 （4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 （5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 （6）洗板，同（4）。 （7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 （8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 （9）洗板，同（4）。 （10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 （11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 （12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 （13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。 CD44v5 /FITC 荧光su标记兔抗人、大、小鼠CD44V5抗体IgGMulti-class aibodies规格： 0.2ml COX10/FITC 荧光su标记COX10抗体IgGMulti-class aibodies规格： 0.2ml Rhesus aibody Rh CD69/CLEC2C/AIM 活化诱导分子CD69抗体 规格 0.1ml PAR4 (protease-activated receptor 4) 活化受体4/凋亡反应4抗原 0.5mg IL-13Ra2 白介su-13受体a2抗体 0.1ml Rhesus aibody Rh Tap1/ABCB2 ATP结合转运1抗体 规格 0.2ml COX10/FITC 荧光su标记COX10抗体IgGMulti-class aibodies规格： 0.2ml LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit 人脂氧suA4Multi-class aibodies规格： 48T Phospho-PEA15 (Ser104) 磷suan化星形胶质PEA15抗体Multi-class aibodies规格： 0.1ml
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