胚癌细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。 细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。 细胞的相关产品如下: Pcc4 胚癌细胞 CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞 COS-1 非洲绿肾 COS-7 非洲绿猴肾细胞 CV-1 猴肾细胞 IAR20 小鼠肝细胞 IEC-6 大鼠小肠隐窝上皮细胞 LL-PK1, 猪肾细胞 MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞 MDCK 狗肾细胞 NIH3T3 小鼠胚胎成纤维细胞 细胞计数: 1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。 2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸 5滴细胞悬液到一离心管中,加入 5滴台盼蓝染 液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。 3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 4.统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有 16 个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。 5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:(细胞悬液的细胞数)/ml= ( 四个大格子细胞数/4) ×2×104 说明:公式中除以4 因为计数了4 个大格的细胞数。公式中乘以2因为细胞悬液于染液是 1:1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 公司其他生物培养基产品有: 植物(大豆)蛋白胨 Peptone from Soybean Meal 培养基原材料,含碳水化合物,提供细菌生长氮源 细菌蛋白胨 Peptone Bacteriological 培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子 月示胨 Proteose peptone 培养基原材料,为营养要求高的细菌生长提供营养 三号胆盐 No. 3 Bile Salt 用于抑制革兰氏阳性菌的生长 牛心浸粉 Beef Heart Infusion 培养基原材料,提供丰富的营养成份 肝浸粉 Liver Infusion 培养基原材料,为营养要求高的细菌提供生长营养成份 牛胆盐 Bile Salt 用于抑制革兰氏阳性菌的生长 酸水解酪蛋白 Casein acid Hydrolysate 培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子 多价蛋白胨 Polypeptone 培养基原材料,提供细菌生长所需的生长因子 特殊蛋白胨 Peptone Special 培养基原材料,提供丰富的营养成份 细胞计数要点: 1.进行细胞计数时,要求悬液中细胞数目不低于104个/ml,如果细胞数目很少要进行离心再悬浮于少量培养液中; 2.要求细胞悬液中的细胞分散良好,否则影响计数准确性。 3.取样计数前,应充分混匀细胞悬液,尤其时多次取样计数时更要注意每次取样都 要混匀,以求计数准确; 4. 数细胞的原则是只数完整的细胞,若细胞聚集成团时,只按照一个细胞计算。如果细胞压在格线上时,则只计上线,不计下线,只计右线,不计左线。 5. 操作时,注意盖片下不能有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中,否则要重新计数。 Pcc4 U-937 人淋巴瘤细胞 3T3 swiss swiss鼠胚胎成纤维细胞 3T3L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) 3T6swiss 小鼠胚胎成纤维细胞 BA/F3 小鼠原B细胞 BHK-21 金黄地鼠肾 BS-C-1 非注洲绿猴肾 C2C12 小鼠成肌细胞 C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纤维细胞 CHOdhfr 二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 |