羊膜细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞的复苏 : 细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。 细胞的相关产品如下: H.A. 羊膜细胞 95-D 高转移肺癌 A375 恶性黑色素瘤 Calu-3 肺腺癌 (胸膜渗出液) Bowes Melanoma 黑色素瘤 LTEP-a-2 肺腺癌 MM96L 黑色素瘤 SH-77 小细胞肺癌 J-111 单核细胞白血病 NCI-H446 小细胞肺癌 Dami 巨核细胞 实验前准备: 1.将水浴锅预热至 37℃ 2.用 75%酒精擦拭紫外线照射 30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 取出冻存管:根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。 迅速解冻:迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。约 1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。 平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心 3min 公司其他生物培养基产品有: 乙酰胺琼脂 Acetamide Agar 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准) 十六烷*基溴化铵琼脂 Cetrimide Agar 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准) 甘露醇发酵培养基 Mannitol Medium 生化试验培养基,用于细菌(如金黄色葡萄球菌)甘露醇发酵试验(GB标准) 明胶培养基基础 Gelatin Medium Base 生化试验培养基,用于细菌明胶液化试验(GB标准) 绿脓菌素测定培养基(PDP) King Medium A 用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准) 乳糖胆盐培养基 Lactose Bile Medium 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准) TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂 TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar 用于化妆品中细菌总数测定(GB标准) HC琼脂基础 HC Agar Base 用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia 方法) 改良LETHEEN琼脂基础 LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 用于化妆品中微生物检测(Acumedia 方法) TAT肉汤 TAT Broth 用于化妆品和药品中微生物检测(Acumedia方法) H.A. MDA-MB-435S 乳腺管癌 JAR 胎盘绒毛癌 T47D 乳腺管癌 RD 恶性胚胎横纹肌瘤 HBL-100 乳腺细胞 BT-325 神经胶质瘤 SMC-1 恶性胸膜间皮瘤 SK-N-SH 神经母细胞瘤 A2 肺癌 SHG-44 胶质瘤 制备细胞悬液: 1.吸弃上清液。 2.向离心管内加入 10ml 培养液,吹打制成细胞悬液。 细胞计数:细胞浓度以 5×105/ml 为宜。 培养细胞 :将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内 ,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者 24-48 小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。 |