小肝细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 初学者易犯错误: 1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。 细胞的相关产品如下: QSG-7701 小肝细胞 HEp-2 喉表皮样癌 SCaBER 膀胱鳞癌 CNE 鼻咽癌 Ho-8910 卵巢癌 TT 髓性甲状腺癌 L1 卵巢癌 Bcap-37 乳腺癌 HeLa 宫颈癌 MCF-7 乳腺腺癌 HCC 子宫高分化鳞癌 细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。 细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。 公司其他生物培养基产品有: Fraser 添加剂 Fraser Supplement 添加到HB4193中,用于李氏菌的选择性增菌培养 UVM培养基 UVM Medium 用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准) UVM 添加剂1 UVM Supplement1 添加到HB4195中,用于李氏菌的选择性增菌培养 LM-137琼脂 LM-137 Agar 用于膜滤法单增李氏菌选择性分离(NEOGEN标准) MRS 琼脂基础 MRS Agar Base 用于食品中乳酸菌总数测定 UBA 培养基 UBA Medium 用于啤酒中厌氧菌检测 NBB 培养基 NBB Agar 用于啤酒中厌氧菌检测 Raka-Ray 培养基 Raka-Ray Medium 用于啤酒中乳酸菌检测和分离培养 SCDLP液体培养基 Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth 用于化妆品样品制备,前增菌培养(GB标准) 卵磷脂吐温80营养琼脂 Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 用于化妆品细菌总数测定(GB标准) 细胞计数: 1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。 2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸 5滴细胞悬液到一离心管中,加入 5滴台盼蓝染 液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。 3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 4.统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有 16 个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。 5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:(细胞悬液的细胞数)/ml= ( 四个大格子细胞数/4) ×2×104 说明:公式中除以4 因为计数了4 个大格的细胞数。公式中乘以2因为细胞悬液于染液是 1:1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 QSG-7701 A431 表皮癌 A673 横纹肌癌 Tca-8113 舌鳞癌 SMMC-7721 肝癌 Acc-2 涎腺腺样囊性癌 786-O 肾透明细胞腺癌 Acc-3 涎腺腺样囊性癌 PC-3 前列腺癌 KB 口腔表皮样癌 T-24 膀胱变移细胞癌 |