小鼠T细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 传代前准备: 1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入 37℃水浴锅内预热。 2.用 75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。 4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8 分钟再次消毒。 6.取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。 细胞的相关产品如下: CTLL-2 小鼠T细胞 IEC-6 大鼠小肠隐窝上皮细胞 LL-PK1, 猪肾细胞 MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞 MDCK 狗肾细胞 NIH3T3 小鼠胚胎成纤维细胞 P815 小鼠肥大细胞 PA12 小鼠成纤维细胞 RTE 大鼠气管上皮细胞 SF9 昆虫卵巢细胞 SMC 兔主动脉平滑肌细胞 胰蛋白酶消化; 1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用 PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液), 注意消化液的量以盖住细胞,*消化温度是 37℃。 2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。 公司其他生物培养基产品有: CCDA添加剂 CCDA Supplement 每支添加于200mlCCDA基础中 Campy-Cefex 琼脂基础 Campy-Cefex Agar Base 用于弯曲杆菌分离培养(FDA方法) Campy-Cefex 添加剂 Campy-Cefex Supplement 每支添加于200ml Campy-Cefex 琼脂基础中 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数(GB.SN标准) 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定 (SN标准) 改良V-P培养基 V-P Medium,Modified 用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验(SN标准) 胰酪胨大豆羊血琼脂基础 Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试验(SN标准) 酪蛋白琼脂 Casein Agar 用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验 (GB标准) 酚红葡萄糖肉汤 Phenol Red Dextrose Broth 用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准) 硝酸盐肉汤 用于蜡样芽孢杆菌硝酸盐还原试验(SN标准) CTLL-2 BHK-21 金黄地鼠肾 BS-C-1 非注洲绿猴肾 C2C12 小鼠成肌细胞 C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纤维细胞 CHOdhfr 二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞 COS-1 非洲绿肾 COS-7 非洲绿猴肾细胞 CV-1 猴肾细胞 IAR20 小鼠肝细胞 吹打分散细胞: 1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入 10ml 离心管中。 3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以 1000转/分钟离心 6-8分钟。 4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入 2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 |