肝细胞癌细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞的相关产品如下: BEL-7402 肝细胞癌细胞 YAC-1 淋巴瘤 MFC 前胃癌 L1210 淋巴白血病 AtT20 垂体瘤 P388D1 淋巴样瘤 SRS-82 腹水瘤 P3-NS-1/1-Ag4.1 骨髓瘤 B16 黑色素瘤 J774A.1 单核细胞-巨噬细胞 C127 乳腺肿瘤 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH到 7.2左右)或 PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀,置于 4℃内过夜。 用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22 微米微孔滤膜)抽滤除菌。然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。 青、链霉素溶液的配制于消毒 1. 所用纯净水(双蒸水)需要 15 磅高压 20 分钟灭菌。 2.具体操作均在超净台内完成。青霉素是 80 万单位/瓶,用注射器加 4ml灭菌双蒸水。链霉素是100万单位/瓶,加5ml 灭菌双蒸水,即每毫升各为 20 万单位。 3.使用时溶入培养液中,使青链霉素的浓度zui终为 100 单位/ml。1单位=1 微克. RPMI1640 的制备与消毒: 1.溶解、调 PH 值、定容:先将培养基粉剂加入培养液体积 2/3 的双蒸水中,并用双蒸水冲洗包装袋 2-3 次(冲洗液一并加入培养基中),充分搅拌至粉剂全部溶解,并按照包装说明添加一定的药品.然后用注射器向培养基中加入配制好的青链霉素液各0.5ml, 使青链霉素的浓度zui终各为100单位/ml。然后用一个当量的盐酸和NaOH调 PH到 7.2 左右。zui后定容至1000ml,摇匀。 2.安装蔡式滤器:安装时先装好支架,按规定放好滤膜,用螺丝将不锈钢滤器和支架连接好。然后卸下支架腿分别用布包好待消毒。 3.抽滤:配制好的培养液通常用滤器过滤除菌。通常用蔡式滤器在超净工作台内过滤。 4.分装:将过滤好的培养液分装入小瓶内置于 4℃冰箱内待用。 5.使用前要向100ml培养液中加入1ml 谷氨酰胺溶液(4℃时两周有效)。 血清的灭火: 细胞培养常用的是小牛血清,新买来的血清要在56℃水浴中灭火 30 分钟后,再经过抽滤方可加入培养基中使用。 公司其他生物培养基产品有: 抗生素5号 Antibiotic No.5 用于两性霉素B检定菌种培养 MUG培养基 MUG Medium 用于大肠杆菌测定 真菌琼脂培养基 Fungi Agar Medium 用于无菌生长试验 磷酸盐葡萄糖胨水培养基 Phosphate Glucose Peptone Water Medium 用于甲基红试验 甲基红指示剂盒 用于甲基红试验配套试剂 胰蛋白胨水培养基 用于靛基质试验 Kovacs氏靛基质试剂盒 用于吲哚(靛基质)试验配套试剂 ASS 琼脂 Antibiotic sulfonamide sensitivity-test agar 用于磺胺类灵敏度试验(WHO方法) AC肉汤 AC Broth 用于常见微生物增菌培养和不含防腐剂样品的无菌试验(Alpha Biosciences方法) 硝酸盐胨水培养基 Nitrate Saline Peptone Water Medium 用于硝酸盐还原产气试验 BEL-7402 COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾 LLC-MK2 恒河猴肾 MLA-144 长臂猿淋巴瘤 B95-8 EBV转化的绒猴白细胞 NISE-Sacy-12 蓖麻蚕卵细胞 ZC-7901 草鱼吻端细胞 RF/6A 猴脉络膜-视网膜细胞(内皮) Mv1Lu 貂肺上皮细胞 Pcc4 胚癌细胞 P815 肥大细胞瘤 HEPES溶液:HEPES 的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid )。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的 pH 范围。使用终浓度为 10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES 即可达到缓冲能力。 |