低分化结肠腺癌细胞 吹打分散细胞: 1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入 10ml 离心管中。 3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以 1000转/分钟离心 6-8分钟。 4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入 2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 分装稀释细胞: 1.分装:将细胞悬液吸出分装至 2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。 继续培养: 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25%时为一个+,占50%为++,占 75%时为+++。 传代细胞培养注意事项: 1.严格的无菌操作 2.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。 EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红 4ml, 加入蒸馏水定容至 1000ml。10磅 20min 高压灭菌,使用时调节 PH 值到 7.4。注意 EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要*清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。 细胞的复苏 : 细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞的相关产品如下: HCT-116 低分化结肠腺癌细胞 U251 神经胶质细胞瘤细胞 NCI-H345 小细胞肺癌细胞 M17 神经母细胞瘤细胞 NCI-H446 小细胞肺癌细胞 LAN-5 神经母细胞瘤细胞 Bcap-37 乳腺髓样癌细胞 BT474 乳腺导管瘤细胞 SK-N-SH 神经母细胞瘤细胞 MDA-MB-157 乳腺癌细胞 MDA-MB-231 乳腺导管癌细胞 公司其他生物培养基产品有: 卵磷脂吐温80营养琼脂 Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 用于化妆品细菌总数测定(GB标准) 乙酰胺琼脂 Acetamide Agar 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准) 十六烷*基溴化铵琼脂 Cetrimide Agar 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准) 甘露醇发酵培养基 Mannitol Medium 生化试验培养基,用于细菌(如金黄色葡萄球菌)甘露醇发酵试验(GB标准) 明胶培养基基础 Gelatin Medium Base 生化试验培养基,用于细菌明胶液化试验(GB标准) 绿脓菌素测定培养基(PDP) King Medium A 用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准) 乳糖胆盐培养基 Lactose Bile Medium 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准) TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂 TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar 用于化妆品中细菌总数测定(GB标准) HC琼脂基础 HC Agar Base 用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia 方法) 改良LETHEEN琼脂基础 LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 用于化妆品中微生物检测(Acumedia 方法) HCT-116 RAMOS B淋巴细胞瘤细胞 GLC-82 肺腺癌细胞 THP 1 单核细胞型淋巴瘤细胞 H1299 肺腺癌细胞 U-937 淋巴瘤细胞 NCI-H157 非小细胞肺腺癌细胞 RPMI-8226 多发骨髓瘤细胞 LIEP-P 小细胞肺癌细胞 SHG-44 脑恶性胶质瘤细胞 NEI-H209 小细胞肺癌细胞 |