绒癌细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞的相关产品如下: JEG-3 绒癌细胞 K562 慢性髓原白血病细胞 973 肺腺癌细胞 HPB-ALL T细胞白血病细胞 A2 肺腺癌细胞 HL-60 白血病细胞 A549 肺腺癌细胞 Daudi B淋巴细胞瘤细胞 A549/DDP 肺腺癌顺铂耐药株 Raji Burkitt淋巴瘤细胞 Calu-3 肺腺癌细胞 实验前准备: 1.将水浴锅预热至 37℃ 2.用 75%酒精擦拭紫外线照射 30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 取出冻存管:根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。 迅速解冻:迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。约 1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。 平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心 3min 公司其他生物培养基产品有: Fraser 培养基 Fraser Medium 用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准) Fraser 添加剂 Fraser Supplement 添加到HB4193中,用于李氏菌的选择性增菌培养 UVM培养基 UVM Medium 用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准) UVM 添加剂1 UVM Supplement1 添加到HB4195中,用于李氏菌的选择性增菌培养 LM-137琼脂 LM-137 Agar 用于膜滤法单增李氏菌选择性分离(NEOGEN标准) MRS 琼脂基础 MRS Agar Base 用于食品中乳酸菌总数测定 UBA 培养基 UBA Medium 用于啤酒中厌氧菌检测 NBB 培养基 NBB Agar 用于啤酒中厌氧菌检测 Raka-Ray 培养基 Raka-Ray Medium 用于啤酒中乳酸菌检测和分离培养 SCDLP液体培养基 Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth 用于化妆品样品制备,前增菌培养(GB标准) 制备细胞悬液: 1.吸弃上清液。 2.向离心管内加入 10ml 培养液,吹打制成细胞悬液。 细胞计数:细胞浓度以 5×105/ml 为宜。 培养细胞 :将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内 ,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者 24-48 小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。 JEG-3 A375 皮肤黑色素瘤细胞 RCC-krause 肾癌细胞 A875 黑色素瘤细胞 Ketr-3 肾癌(瘤株) SK-HEL-1 皮肤黑色素瘤细胞 SW 13 肾上腺皮质瘤细胞 A431 皮肤基底细胞癌细胞 96-C 低转移肺癌细胞 CEM 白血病细胞 95-D 高转移肺癌细胞 初学者易犯错误: 1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。 细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。 |