大鼠肝细胞瘤 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 初学者易犯错误: 1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。 细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。 细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。 细胞的相关产品如下: H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤 CCC-HHM-2 人胚心肌组织来源细胞 CCC-HIE-2 人胚肠粘膜组织来源细胞 CCC-HPE-2 人胚胰腺组织来源细胞 CCC-SMC-1 兔主动脉平滑肌细胞 293sars181A Sars蛋白表达株 A-204 人横纹肌肉瘤 A375 人皮肤黑色素瘤细胞 A431 人皮肤基底细胞癌 A549 人肺癌细胞 A875 人黑色素瘤细胞 细胞计数: 1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。 2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸 5滴细胞悬液到一离心管中,加入 5滴台盼蓝染 液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。 3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 4.统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有 16 个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。 5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:(细胞悬液的细胞数)/ml= ( 四个大格子细胞数/4) ×2×104 说明:公式中除以4 因为计数了4 个大格的细胞数。公式中乘以2因为细胞悬液于染液是 1:1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 公司其他生物培养基产品有: MiddleBrook 7H10 琼脂 MiddleBrook 7H10 Agar 用于分枝杆菌的分离培养 MiddleBrook 7H11 琼脂 MiddleBrook 7H11 Agar 用于分枝杆菌的分离培养 气单胞菌鉴别琼脂 Aeromonas Differential Agar 用于分离培养和鉴别气单胞菌 精氨酸肉汤 Arginine Broth acc. To Schubert 用于游泳池中假单胞菌检测(Merck方法) 曲霉素琼脂基础(AFPA) 用于曲霉菌分离培养 假单胞分离琼脂 Pseudomonas Isolation Agar 用于假单胞菌群的测定 假单胞分离肉汤 Pseudomonas Isolation Broth 用于假单胞菌群增菌培养 肌醇测定培养基 Inositol Assay Broth 用于婴幼儿配方食品和乳粉中肌醇测定 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 Bromcresol Purple Dextrose Broth 用于低酸性罐头食品商业无菌检验(GB标准) 酸性肉汤 Acid Broth 用于酸性缺罐头食品商业无菌检验(GB标准) H-4-II-E HK-2 人肾近曲小管上皮细胞 HKC 人胚肾上皮细胞 MRC-5 人胚肺成纤维细胞 WISH 人羊膜细胞 CCC-HEL-1 人胚胎肝正常细胞 CCC-HEK-1 人胚胎肾正常细 CCC-HB-2 人胚胎膀胱组织来源细胞 CCC-HIE-2 人胚胎肠粘膜细胞 CCC-HBE-2 人胚胎气管细胞 CCC-HEL-1 人胚肝二倍体细胞 |