小鼠胚胎成纤维细胞 继续培养: 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25%时为一个+,占50%为++,占 75%时为+++。 传代细胞培养注意事项: 1.严格的无菌操作 2.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。 EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红 4ml, 加入蒸馏水定容至 1000ml。10磅 20min 高压灭菌,使用时调节 PH 值到 7.4。注意 EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要*清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。 细胞的复苏 : 细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞的相关产品如下: 3T6swiss 小鼠胚胎成纤维细胞 HOS 骨肉瘤细胞 Hep3B 肝癌细胞 MG-63 成骨肉瘤细胞 PAN-1 胰腺导管上皮癌细胞 OS-732 骨肉瘤细胞(瘤株) Panc 10.05 胰腺腺癌细胞 A-204 横纹肌肉瘤细胞 SW1990 胰腺腺癌细胞 HT1080 纤维肉瘤细胞 SK-RC-42 肾癌细胞 实验前准备: 1.将水浴锅预热至 37℃ 2.用 75%酒精擦拭紫外线照射 30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 取出冻存管:根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。 公司其他生物培养基产品有: 疱肉牛肉粒 Dried Meat Particle 加入疱肉基础,配成疱肉培养基 缓冲李氏菌增菌肉汤基础 Buffered Listeria Enrichment Broth 用于李氏菌的增菌培养(MercK标准) 缓冲李氏菌增菌肉汤基础添加剂 Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement 每支加入225ml缓冲李氏菌增菌肉汤基础中 PALCAM 琼脂 PALCAM Agar 用于单增李氏菌选择性分离 PALCAM添加剂 PALCAM Supplement 添加到HB4188中,用于李氏菌的选择性分离培养 LPM琼脂 LPM Agar 用于单增李氏菌选择性分离(加入七叶苷和柠檬酸铁铵)(FDA标准) Half –Fraser 培养基 Half-Fraser Medium 用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准) Half –Fraser 添加剂 Half-Fraser Supplement 添加到HB4190中,用于李氏菌的选择性增菌培养 改良缓冲蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 用于单增李氏菌前增菌培养 EB增菌液 EB Enrichment Broth 用于单增李氏菌选择性增菌培养(SN标准) 3T6swiss HCT-116 低分化结肠腺癌细胞 DU-145 前列腺癌细胞 HT-29 结肠腺癌细胞 LNCa 前列腺癌细胞 Lovo 结肠癌细胞 SW480 结肠癌细胞 PC-3 前列腺癌细胞 BEL-7402 肝细胞癌细胞 Tsu-Pr1 非雄激素依赖型前列腺癌 HCC-9204 肝癌细胞 |