人皮肤黑色素瘤细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 水的制备: 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 PBS的制备与消毒(也可用于其它 BSS,如:Hanks,D-Hanks 液的配制): 1.溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4•H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛 有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至 1000ml,摇匀即成新配制的 PBS溶液。 2.移入溶液瓶内待消毒:将 PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内8 磅消毒 20 分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。 胰蛋白酶溶液的配制与消毒:胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH为 8.0、温度为 37℃时,胰酶溶液的作用能力zui强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的 BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。 细胞的相关产品如下: A375 人皮肤黑色素瘤细胞 HelaS3 宫颈癌细胞 CoLo 320DM 结肠癌细胞 HEC-1B 子宫内膜癌细胞 HCT-8 回盲肠腺癌细胞 JEG-3 绒癌细胞 HCT-116 低分化结肠腺癌细胞 DU-145 前列腺癌细胞 HT-29 结肠腺癌细胞 LNCa 前列腺癌细胞 Lovo 结肠癌细胞 公司其他生物培养基产品有: 厌氧菌琼脂 Anaerobic Agar 用于厌氧菌分离培养 CDC厌氧菌琼脂 CDC Anaerobic Agar 用于厌氧菌分离培养(Acumedia 方法) 溶血性链球菌 葡萄糖肉浸液肉汤 Dextrose Meat Infusion Broth 用于溶血性链球菌的增菌培养(GB标准) 匹克 匹克氏肉汤基础A Pick’s Broth BaseA 用于溶血性链球菌的增菌培养 (GB标准) 肉浸液肉汤培养基 Meat Infusion Broth 用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养(GB标准) 叠氮钠葡萄糖肉汤 Azide Dextrose Broth 用于链球菌的增菌培养 乙基紫叠氮钠肉汤 Ethyl Violet Azide Broth 用于链球菌的增菌培养 KF链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 用于链球菌的选择性分离及计数(SN标准) LIM培养基 LIM Medium 用于链球菌的分离培养(Japan方法) A375 Hep-2 喉癌细胞 A2780 卵巢癌细胞 Ec109 食管癌细胞 Coc2 卵巢癌细胞 MGC-803 胃腺癌细胞 OVCAR-3 卵巢癌细胞 SGC7901 胃低分代腺癌细胞 SK-OV-3 卵巢癌细胞 HuTu-80 十二指肠腺癌细胞 SKOV-3/DDP 卵巢癌顺铂耐药株 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH到 7.2左右)或 PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀,置于 4℃内过夜。 |