人胚心肌组织来源细胞 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 分装稀释细胞: 1.分装:将细胞悬液吸出分装至 2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。 继续培养: 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25%时为一个+,占50%为++,占 75%时为+++。 传代细胞培养注意事项: 1.严格的无菌操作 2.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。 EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红 4ml,加入蒸馏水定容至 1000ml。10磅 20min 高压灭菌,使用时调节 PH 值到 7.4。注意 EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要*清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。 细胞的相关产品如下: CCC-HHM-2 人胚心肌组织来源细胞 M2 待查 MDA-MB-453 人乳腺癌细胞 MG-63 人骨肉瘤细胞 MOLT-4 人淋巴细胞白血病细胞 NCI-H157 人非小细胞肺腺癌 NCI-H446 人小细胞肺癌 NTERA-2 人恶性多发性畸胎瘤细胞 PA-1 人卵巢畸胎瘤细胞 PANC-1 人胰腺癌细胞 PC-3 人前列腺癌细胞 公司其他生物培养基产品有: YM琼脂 YM Agar 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分离培养(Acumedia方法) YM11琼脂 YM11 Agar 滤膜法用于霉菌、酵母菌的分离培养(NEOGEN方法) OGY琼脂 OGY Agar 用于霉菌和酵母菌分离培养和计数(Merck方法) WL营养琼脂 WL Nutrient Agar 用于啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的计数 改良沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar,Modified 用于真菌检测 沙氏BHI琼脂 Sabouraud BHI Agar 用于真菌检测(Acumedia 方法) 菌种培养基 Strain Medium(for B.Cereus) 用于四环素检定中蜡样芽孢杆菌的培养(SN标准) 四环素检定琼脂 Tetracyline Examination Agar 用于四环素残留的微生物学检定(SN标准) 亚硫酸盐琼脂 Sulfite Agar 用于厌氧亚硫酸盐还原杆菌的试管计数(SN标准) 改良亚硫酸盐琼脂 Sulfite Agar,modified 用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的计数(SN标准) CCC-HHM-2 JEG-3/VP16 人绒癌细胞VP16耐药株 JEG-3/VP16-IL-2 人绒癌细胞VP16耐药株IL-2转染 JEG-3/VP16-TNFa 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染 Jurkat E6-1 人T细胞淋巴瘤 Jurkat77 人T淋巴瘤细胞亚系 K562 人红白血病细胞 KB 人口腔上皮癌 LNCaP 人前列腺癌(B类) LoVo 人结肠癌 M17 人神经母细胞瘤 |