R1000 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 制备细胞悬液: 1.吸弃上清液。 2.向离心管内加入 10ml 培养液,吹打制成细胞悬液。 细胞计数:细胞浓度以 5×105/ml 为宜。 培养细胞 :将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内 ,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者 24-48 小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。 细胞的相关产品如下: 43056 R1000 ATCC 株 询价 HEL 红细胞白血病 (Erythroleukemia) BGC-823 低分化胃腺癌 HL-60 原髓细胞白血病 (Promyelocytic lenukemia) LoVo 结肠腺癌 Hut-78 皮肤T细胞淋巴瘤 Ls-174-T 结肠腺癌 Hut-102 皮肤T细胞淋巴瘤 HCT-8 回盲肠腺癌 Namalwa Burkitt`s淋巴瘤 HCe-8693 盲肠未分化腺癌 初学者易犯错误: 1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。 细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。 细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。 公司其他生物培养基产品有: 麦康凯琼脂 Maconkey Agar 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂(不含盐) Maconkey Agar(without salt) 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂2号 Maconkey Agar No.2 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 麦康凯琼脂3号 Maconkey Agar No.3 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) 碱性琼脂平板 Alkaline Agar 用于分离霍乱弧菌 碱性胆盐琼脂 Alkaline Bile Salt Agar 用于分离霍乱弧菌 胰膘肉汤基础 Tryptose Broth Base 用于肺炎链球菌、布鲁氏菌属细菌的培养 豆粉琼脂(血琼脂基础) Blood Agar Base 用于配制血琼脂、巧克力琼脂及亚碲酸盐琼脂 细菌L型增菌液 用于L型细菌增菌培养 细菌L型分离琼脂 用于L型细菌分离培养 43056 ATCC 株 询价 Bowes Melanoma 黑色素瘤 LTEP-a-2 肺腺癌 MM96L 黑色素瘤 SH-77 小细胞肺癌 J-111 单核细胞白血病 NCI-H446 小细胞肺癌 Dami 巨核细胞 SPC-A-1 肺腺癌 CHMas 肥大细胞白血病 SGC-7901 胃腺癌 |