MCF-7(人乳腺癌细胞) 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 吹打分散细胞: 1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入 10ml 离心管中。 3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以 1000转/分钟离心 6-8分钟。 4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入 2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 细胞的相关产品如下: MCF-7(人乳腺癌细胞) ATCC 株 询价 CV-1 猴肾细胞 IAR20 小鼠肝细胞 IEC-6 大鼠小肠隐窝上皮细胞 LL-PK1, 猪肾细胞 MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞 MDCK 狗肾细胞 NIH3T3 小鼠胚胎成纤维细胞 P815 小鼠肥大细胞 PA12 小鼠成纤维细胞 RTE 大鼠气管上皮细胞 分装稀释细胞: 1.分装:将细胞悬液吸出分装至 2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。 继续培养: 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25%时为一个+,占50%为++,占 75%时为+++。 公司其他生物培养基产品有: 快速硫化氢(H2S)试验琼脂 Rapid hydrogen sulfide (H2S) test AGAR 用于弯曲杆菌的硫化氢试验(GB标准) 波尔顿选择性增菌肉汤 Bolton Selective Enrichment broth 用于弯曲杆菌选择性增菌培养(Merck方法) CCDA基础 CCDA Base 用于弯曲杆菌分离培养(WHO方法) CCDA添加剂 CCDA Supplement 每支添加于200mlCCDA基础中 Campy-Cefex 琼脂基础 Campy-Cefex Agar Base 用于弯曲杆菌分离培养(FDA方法) Campy-Cefex 添加剂 Campy-Cefex Supplement 每支添加于200ml Campy-Cefex 琼脂基础中 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数(GB.SN标准) 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定 (SN标准) 改良V-P培养基 V-P Medium,Modified 用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验(SN标准) 胰酪胨大豆羊血琼脂基础 Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试验(SN标准) ATCC 株 询价 3T6swiss 小鼠胚胎成纤维细胞 BA/F3 小鼠原B细胞 BHK-21 金黄地鼠肾 BS-C-1 非注洲绿猴肾 C2C12 小鼠成肌细胞 C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纤维细胞 CHOdhfr 二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞 COS-1 非洲绿肾 COS-7 非洲绿猴肾细胞 传代细胞培养注意事项: 1.严格的无菌操作 2.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。 EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红 4ml,加入蒸馏水定容至 1000ml。10磅 20min 高压灭菌,使用时调节 PH 值到 7.4。注意 EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要*清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。 |