SPA-A1(肺腺癌细胞) 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 细胞的相关产品如下: SPA-A1(肺腺癌细胞) ATCC 株 询价 HOS 骨肉瘤细胞 Hep3B 肝癌细胞 MG-63 成骨肉瘤细胞 PAN-1 胰腺导管上皮癌细胞 OS-732 骨肉瘤细胞(瘤株) Panc 10.05 胰腺腺癌细胞 A-204 横纹肌肉瘤细胞 SW1990 胰腺腺癌细胞 HT1080 纤维肉瘤细胞 SK-RC-42 肾癌细胞 实验前准备: 1.将水浴锅预热至 37℃ 2.用 75%酒精擦拭紫外线照射 30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 取出冻存管:根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。 迅速解冻:迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。约 1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。 平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心 3min 公司其他生物培养基产品有: 疱肉牛肉粒 Dried Meat Particle 加入疱肉基础,配成疱肉培养基 缓冲李氏菌增菌肉汤基础 Buffered Listeria Enrichment Broth 用于李氏菌的增菌培养(MercK标准) 缓冲李氏菌增菌肉汤基础添加剂 Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement 每支加入225ml缓冲李氏菌增菌肉汤基础中 PALCAM 琼脂 PALCAM Agar 用于单增李氏菌选择性分离 PALCAM添加剂 PALCAM Supplement 添加到HB4188中,用于李氏菌的选择性分离培养 LPM琼脂 LPM Agar 用于单增李氏菌选择性分离(加入七叶苷和柠檬酸铁铵)(FDA标准) Half –Fraser 培养基 Half-Fraser Medium 用于李氏菌的增菌培养(MERCK标准) Half –Fraser 添加剂 Half-Fraser Supplement 添加到HB4190中,用于李氏菌的选择性增菌培养 改良缓冲蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 用于单增李氏菌前增菌培养 EB增菌液 EB Enrichment Broth 用于单增李氏菌选择性增菌培养(SN标准) 制备细胞悬液: 1.吸弃上清液。 2.向离心管内加入 10ml 培养液,吹打制成细胞悬液。 细胞计数:细胞浓度以 5×105/ml 为宜。 培养细胞 :将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内 ,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者 24-48 小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。 ATCC 株 询价 HCT-116 低分化结肠腺癌细胞 DU-145 前列腺癌细胞 HT-29 结肠腺癌细胞 LNCa 前列腺癌细胞 Lovo 结肠癌细胞 SW480 结肠癌细胞 PC-3 前列腺癌细胞 BEL-7402 肝细胞癌细胞 Tsu-Pr1 非雄激素依赖型前列腺癌 HCC-9204 肝癌细胞 初学者易犯错误: 1 水浴锅未预热或者未预热到 37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。 细胞计数实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 |