J774A1(单核细胞巨噬细胞) 在细胞冻存时加入温保护剂,能大大提高冻存效果。常用的低温保护剂是DMSO,它是一种渗透性保护剂,可迅速透入细胞,提高胞膜对水的通透性,降低冰点,延缓冻结过程,能使细胞内水分在冻结前透出细胞外,在胞外形成冰晶,减少胞内冰晶,从而减少冰晶对细胞的损伤。 准备工作:取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待 长成单层后以被使用。 细胞悬液制备:细胞悬液的制备方法是用 0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或 Hanks 液或 PBS等平衡盐溶液),吹打制成待测细胞悬液。 细胞计数: 1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。 2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸 5滴细胞悬液到一离心管中,加入 5滴台盼蓝染 液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。 3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 4.统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有 16 个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。 5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:(细胞悬液的细胞数)/ml= ( 四个大格子细胞数/4) ×2×104 说明:公式中除以4 因为计数了4 个大格的细胞数。公式中乘以2因为细胞悬液于染液是 1:1 稀释。公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 细胞的相关产品如下: J774A1(单核细胞巨噬细胞) ATCC 株 询价 OVCAR-3 卵巢癌细胞 SGC7901 胃低分代腺癌细胞 SK-OV-3 卵巢癌细胞 HuTu-80 十二指肠腺癌细胞 SKOV-3/DDP 卵巢癌顺铂耐药株 HelaS3 宫颈癌细胞 CoLo 320DM 结肠癌细胞 HEC-1B 子宫内膜癌细胞 HCT-8 回盲肠腺癌细胞 JEG-3 绒癌细胞 公司其他生物培养基产品有: 牛津琼脂(OXA)基础 用于单增李氏菌的选择性分离 Oxford Agar Base (SN标准) 多粘菌素E 添于100ml HB4171中 放线菌酮 添于100ml HB4171中 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 Bromcresol Purple Dextrose Broth 用于低酸性罐头食品商业无菌检验 酸性肉汤 Acid Borth 用于酸性罐头食品商业无菌检验 麦芽浸膏汤 Malt Extract Broth 用于酸性罐头食品商业无菌检验 锰盐营养琼脂 Mn2+Nutrient Agar 用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验 疱肉培养基基础 Cooked Meat Medium Base 加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验 卵黄琼脂基础 Egg Yolk Agar Base 加入卵黄,用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养 ATCC 株 询价 MCF-7 乳腺腺癌细胞 CNE-1 高分化鼻咽癌细胞 MEF-7/Adr 乳腺腺癌阿霉素耐药株 KB 口腔表皮样癌细胞 SK-BR-3 乳腺腺癌细胞 Hep-2 喉癌细胞 A2780 卵巢癌细胞 Ec109 食管癌细胞 Coc2 卵巢癌细胞 MGC-803 胃腺癌细胞 |