人脂肪细胞-内脏 胰蛋白酶消化; 1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用 PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液), 注意消化液的量以盖住细胞,*消化温度是 37℃。 2. 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。 吹打分散细胞: 1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入 10ml 离心管中。 3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以 1000转/分钟离心 6-8分钟。 4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入 2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 分装稀释细胞: 1.分装:将细胞悬液吸出分装至 2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。 继续培养: 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2 培养箱中继续培养。传代细胞 2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积 25%时为一个+,占50%为++,占 75%时为+++。 【细胞复苏的方法】: (l)从液氮中取出冷冻管,迅速投入37~42℃水浴中,晃动,使其尽快融化(1分钟左右)。 (2)用培养液稀释至原体积的10倍以上,直接培养。 (3)或低速离心,去上清,加新鲜培养液培养。 细胞的相关产品如下: 7210 人脂肪细胞-内脏 SRS-82 腹水瘤 P3-NS-1/1-Ag4.1 骨髓瘤 B16 黑色素瘤 J774A.1 单核细胞-巨噬细胞 C127 乳腺肿瘤 RAW264.7 单核细胞-巨噬细胞 F9 胚胎瘤 NG108-15 小鼠神经细胞瘤×大鼠神经胶质细胞杂交细胞 C6 胶质瘤 RH-35 肝癌 公司其他生物培养基产品有: 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 Bromcresol Purple Dextrose Broth 用于低酸性罐头食品商业无菌检验 酸性肉汤 Acid Borth 用于酸性罐头食品商业无菌检验 麦芽浸膏汤 Malt Extract Broth 用于酸性罐头食品商业无菌检验 锰盐营养琼脂 Mn2+Nutrient Agar 用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验 疱肉培养基基础 Cooked Meat Medium Base 加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验 卵黄琼脂基础 Egg Yolk Agar Base 加入卵黄,用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养 疱肉牛肉粒 Dried Meat Particle 加入疱肉基础,配成疱肉培养基 缓冲李氏菌增菌肉汤基础 Buffered Listeria Enrichment Broth 用于李氏菌的增菌培养(MercK标准) 缓冲李氏菌增菌肉汤基础添加剂 Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement 每支加入225ml缓冲李氏菌增菌肉汤基础中 PALCAM 琼脂 PALCAM Agar 用于单增李氏菌选择性分离 7210 ZC-7901 草鱼吻端细胞 RF/6A 猴脉络膜-视网膜细胞(内皮) Mv1Lu 貂肺上皮细胞 Pcc4 胚癌细胞 P815 肥大细胞瘤 YAC-1 淋巴瘤 MFC 前胃癌 L1210 淋巴白血病 AtT20 垂体瘤 P388D1 淋巴样瘤 |