人真皮成纤维母细胞-成人 传代细胞培养注意事项: 1.严格的无菌操作 2.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。 EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红 4ml,加入蒸馏水定容至 1000ml。10磅 20min 高压灭菌,使用时调节 PH 值到 7.4。注意 EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要*清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。 细胞的复苏 : 细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。 细胞的相关产品如下: 2320 人真皮成纤维母细胞-成人 EBTr 牛胚气管 VERO 非洲绿猴肾 MDBK 牛肾细胞 HepII 猴肾 COS-1 SV40转化的非洲绿猴肾 COS-7 SV40转化的非洲绿猴肾 LLC-MK2 恒河猴肾 MLA-144 长臂猿淋巴瘤 B95-8 EBV转化的绒猴白细胞 NISE-Sacy-12 蓖麻蚕卵细胞 公司其他生物培养基产品有: 萘啶酮酸 添加于225ml HB4160中制成LB1 萘啶酮酸 添加于200ml HB4160中制成LB2 吖啶黄素 添加于225ml HB4160中制成LB1 吖啶黄素 添加于200ml HB4160中制成LB2 七叶苷培养基 Esculin Medium 生化试验培养基,用于细菌七叶苷利用试验(SN标准) 半固体动力培养基 Motility Test Medium(Semisolid) 用于动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等(SN标准) 牛津琼脂(OXA)基础 用于单增李氏菌的选择性分离 Oxford Agar Base (SN标准) 多粘菌素E 添于100ml HB4171中 放线菌酮 添于100ml HB4171中 实验前准备: 1.将水浴锅预热至 37℃ 2.用 75%酒精擦拭紫外线照射 30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 取出冻存管:根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。 迅速解冻:迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。约 1-2min后冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。 平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心 3min 2320 CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO细胞 SL-7 胚肺细胞 XJH B淋巴细胞 L-02 肝细胞 Chang Liver 张氏肝细胞 QSG-7701 小肝细胞 H.A. 羊膜细胞 293 Ad5DNA转化的胚肾细胞 WISH 羊膜细胞 CV-1(M) 非洲绿猴肾 |