本公司专业代理ATCC细胞，提供售前售后一条龙服务，若要获取详细人胚肾细胞；293 [HEK-293]的说明书或价格信息，请咨询在线客服。 细胞名称 人胚肾细胞；293 [HEK-293] 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:10~1:20传代，每2~3天换液1次。 传代情况 P20 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法（-） STR Amelogenin：X；CSF1PO：7，12；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：15，18；D21S11：28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11；D8S1179：12，14；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19； 同工酶 染色体 
细胞种类
冻存
对培养的细胞进行冻存的方法是将细胞置于含有(DMSO)等冷冻保护剂的*培养基中于液氮中储存。冷冻保护剂可降低培养基的冰点，并可减缓冷却速度吗，大大降低冰晶形成的危险 (冰晶可损伤细胞，导致细胞死亡)。
注：DMSO 可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时，应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范，并应按照当地法规处置此类试剂。
细胞冻存指导原则
冻存细胞系以备将来之用时，必须遵守以下原则。与其他细胞培养操作一样，我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明，以便获得结果。
1）在高细胞浓度情况下进行培养细胞的冻存，并且细胞传代次数尽可能少。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意冻存条件取决于所用细胞系。
2）细胞应缓慢冷冻，可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器使温度每分钟大约降低1°C。
3）必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂
4）将冷冻的细胞于 -70°C 以下温度储存；温度高于 -50°C 时，冷冻的细胞将开始变质。
5）必须使用无菌冻存管储存冷冻的细胞。装有冷冻细胞的冻存管可浸于液氮或者在液氮上方的气相空间内保存
6）必须穿戴个人防护设备。
7）所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术，并且在层流通风橱内进行。 冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的*冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型*冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需*培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 EDTA, 0.5M无菌溶液, pH8.0 EDTA, 0.5M STERILE SOLUTION 100ML 生物技术级 EDTA, 0.5M无菌溶液, pH8.0 EDTA, 0.5M STERILE SOLUTION 500ML 生物技术级 MES缓冲液,无水 MES BUFFER ANHYDROUS 4432-31-9 100G 高纯级 MES缓冲液,无水 MES BUFFER ANHYDROUS 4432-31-9 250G 高纯级 MES缓冲液,无水 MES BUFFER ANHYDROUS 4432-31-9 500G 高纯级 6X核酸电泳上样缓冲液,15%菲可 AGAROSE GEL LOADING DYE, 6X 5ML 超纯级 酸性蓝 1(食品蓝 3) PATENT BLUE VF 129-17-9 25G 超纯级 乙醇 ETHANOL ANHYDROUS, DENATURED 64-17-5 4 L 生物技术级 乙醇 ETHANOL ANHYDROUS, DENATURED 64-17-5 500ML 生物技术级 蛋白酶K,20mg/ml溶液 PROTEINASE K, 20MG/ML SOLUTION 25ML 生物技术级 蛋白酶K,20mg/ml溶液 PROTEINASE K, 20MG/ML SOLUTION 5ML 生物技术级 Tris溶液 1M TRIS PH 8.0 100ML 生物技术级 Tris溶液 1M TRIS, PH 8.0 500ML 生物技术级 即用型细菌细胞裂解液 COMPLETE CELL LYSIS SOLUTION 5ML 生物技术级 鱼精DNA, 已剪切/已变性 DNA SHEARED & DENATURED - 1ML 25ML 生物技术级 鱼精DNA, 已剪切/已变性 DNA, SHEARED/DENATURED 20MG/ML 5ML 生物技术级 ADA缓冲液 ADA BUFFER 26239-55-4 100G 高纯级 ADA缓冲液 ADA BUFFER 26239-55-4 25G 高纯级 DNA Marker MOL WT MARKER,DNA,HIGH RANGE*DRYICE 150 µg 生物技术级 氯化镍,六水 NICKEL CHLORIDE, HEXAHYDRATE 7791-20-0 250G 技术级 氯化镍,六水 NICKEL CHLORIDE, HEXAHYDRATE 7791-20-0 50G 技术级 DENHARDT'S溶液,100X 100X DENHARDT'S SOLUT ION * DRYICE* 10ML 生物技术级 DENHARDT'S溶液,100X 100X DENHARDT'S SOLUTION * DRYICE* 50ML 生物技术级 DNA Marker MOL WT MARKER,DNA LOW RANGE I-DRYIC 100 µg 生物技术级 3X核酸电泳上样缓冲液,测序用 SEQUENCING GEL LOADING DYE, 3X 1ML 超纯级 3X核酸电泳上样缓冲液,测序用 SEQUENCING GEL LOADING DYE, 3X 5ML 超纯级 5X核酸电泳上样缓冲液,30%甘油 GLYCEROL GEL LOADING DYE, 5X 1ML 超纯级 5X核酸电泳上样缓冲液,30%甘油 GLYCEROL GEL LOADING DYE, 5X 5ML 超纯级 2X蛋白电泳上样缓冲液 PROTEIN GEL LOADING BUFFER, 2X 1ML 超纯级 2X蛋白电泳上样缓冲液 PROTEIN GEL LOADING BUFFER, 2X 5ML 超纯级 25X 蛋白电泳上样染料 LOADING DYE BASE, 25X 1ML 超纯级 25X 蛋白电泳上样染料 LOADING DYE BASE, 25X 5ML 超纯级 DNA Marker WIDE RANGE DNA MOL MARKER * DRYICE* 200 µg 生物技术级 5X核酸电泳上样缓冲液,40%蔗糖 SUCROSE GEL LOADING DYE, 5X 1ML 超纯级 5X核酸电泳上样缓冲液,40%蔗糖 SUCROSE GEL LOADING DYE, 5X 5ML 超纯级 人胚肾细胞；293 [HEK-293]酚:: 125:24:1(pH 4.5) PHENOL CHLOROFORM 5:1 SOLUTION 100ML 生物技术级 酚:: 125:24:1(pH 4.5) PHENOL CHLOROFORM 5:1 SOLUTION 400ML 生物技术级 DNA Marker MARKS-IT *DRYICE* 129-17-9 100 µg 生物技术级 CHAPSO CHAPSO 82473-24-3 |
