细胞名称 人皮肤黑色素瘤细胞；SK-MEL-1

形态特性 球形

生长特性 悬浮生长

特征特性 该细胞由Oettgen F及其同事从一名29岁的患有广泛、快速进展性恶性黑色素瘤的白人男性患者的胸导管中分离建立的。该细胞可产生黑色素，电镜检测发现细胞中色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对该细胞系的抗体。

培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS

传代方法 维持细胞浓度在1×105~2×105,每周补液2~3次。

传代情况 C5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：13，16；D19S433：15，16.2；D21S11：29，32.2；D2S1338：19，23；D3S1358：14，16；D5S818：12，13；D7S820：12；D8S1179：16；FGA：18，20；TH01：6；TPOX：11；vWA：16，17；

同工酶

染色体 53~73，XY

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

, 挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 5% EZ SQZ. *CLDPAK* 5X75ML 生物技术级

5.5% GENE-PAGE PLUS,挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 5.5% EZ SQZ. *CLDPAK 10X75ML 生物技术级

5.5% GENE-PAGE PLUS,挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 5.5% EZ SQZ. *CLDPAK 5X75ML 生物技术级

6% GENE-PAGE PLUS, 挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 6% EZ SQZ.  *CLDPAK* 10X75ML 生物技术级

6% GENE-PAGE PLUS, 挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 6% EZ SQZ.  *CLDPAK* 5X75ML 生物技术级

8% GENE-PAGE PLUS, 挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 8% EZ SQZ.  *CLDPAK* 10X75ML 生物技术级

8% GENE-PAGE PLUS, 挤压式瓶装 GENE PAGE PLUS 8% EZ SQZ.  *CLDPAK* 5X75ML 生物技术级

5.25% GENE-PAGE PLUS,挤压式瓶装 GENE-PAGE PLUS 5.25% EZ SQZ.*CLDPAK 10X75ML 生物技术级

5.25% GENE-PAGE PLUS,挤压式瓶装 GENE-PAGE PLUS 5.25% EZ SQZ.*CLDPAK 5X75ML 生物技术级

L-半胱氨酸 L-CYSTINE 56-89-3 100G 美国药典级

L-半胱氨酸 L-CYSTINE 56-89-3 500G 美国药典级

L-半胱氨酸 L-CYSTEINE 52-90-4 100G 高纯级

L-半胱氨酸 L-CYSTEINE 52-90-4 1KG 高纯级

L-半胱氨酸 L-CYSTEINE 52-90-4 500G 高纯级

 4.5% GENE-PAGE 29:1, 6 M 尿素 GENE PAGE 29:1, 4.5%  *CLDPAK* 4X500ML 生物技术级

 4.5% GENE-PAGE 29:1, 6 M 尿素 GENE PAGE 29:1, 4.5%  *CLDPAK* 5X100ML 生物技术级

水杨酸钠 SALICYLIC ACID 54-21-6 100G 高纯级

水杨酸钠 SALYCYLIC ACID 54-21-6 500G 高纯级

饱和酚,单相 PHENOL, BUFFER-SATURATED 1 PHASE 100ML 生物技术级

饱和酚,单相 PHENOL, BUFFER-SATURATED 1 PHASE 400ML 生物技术级

酚::25:24:1,单

Anti-Rad51/FITC  荧光素标记Rad51抗体IgG

Anti-Rad52/FITC  荧光素标记Rad52抗体IgG

Anti-RAD51C/FITC  荧光素标记癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗体IgG

Anti-RAM-11/FITC  荧光素标记抗RAM-11抗体IgG

Anti-RAMP-1/FITC  荧光素标记受体活性调制蛋白1抗体IgG

anti-RAP1A/FITC  荧光素标记抗Rap1抗体IgG

Anti-RAR- Alpha /FITC  荧光素标记维甲酸受体-α 抗体IgG

Anti-RAR- Beta /FITC  荧光素标记维甲酸受体-β抗体IgG

Anti-Phospho-Raptor (Ser792) /FITC  荧光素标记磷酸化mTOR相关调控蛋白抗体IgG

人皮肤黑色素瘤细胞；SK-MEL-1Anti-RASSF1A/FITC  荧光素标记Ras相关区域家族1A抗体IgG

Anti-RASGRF1/FITC  荧光素标记Ras特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1抗体IgG

Anti-Phospho-RasGRF1 (Ser916)/FITC  荧光素标记磷酸化Ras特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1抗体IgG

Anti-Rb/P105 RB/

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。