细胞名称 人肺癌细胞；A-427 [A427]

形态特性 上皮样

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞系由Giard DJ建立，源自一位52岁的肺癌男性白人患者。

培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；1% NEAA,1mM丙酮酸钠

传代方法 1:2~1:6传代，6~8天1次；每周换液2次。

传代情况 C4

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

) Presence Absence Broth 现隐肉汤 250

Anti-ADAMTS7(NT)  整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 (N端抗体) 用于细菌醋酸盐试验 Acetate Agar 醋酸盐琼脂 250

Anti-DRADA (N terminal)   双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（N端） 用于饲料中细菌总数测定 Water Plate Count Agar 水平板计数琼脂培养基 250

Anti-DRADA (C terminal)  双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（C端） 用于饮用水中异生细菌分离培养(ACUMEDIA方法) R2A Agar R2A 琼脂 250

Anti-Adducin protein  内收蛋白抗体 用于培养营养要求高的微生物 (ACUMEDIA方法) Heart Infusion Agar 心浸液琼脂 250

Anti-ADK/AK  腺苷酸激酶抗体 用于饮料中耐酸细菌的分离培养(ACUMEDIA方法) ORANGE SERUM AGAR 桔汁琼脂 250

Anti-AEG-1  AEG-1抗体 用于食品和饮料肠球菌的分离培养(MERCK方法) CATC Agar CATC琼脂 250

Anti-ADFP  脂肪组织分化相关蛋白抗体 用于致病性大肠杆菌的增菌培养和肠杆菌的增菌培养(Japan方法) EEM medium EEM培养基 250

Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus)  禽脑脊髓炎病毒AEV抗体 用于大肠杆菌的膜过滤法选择性培养(ISO标准) Tryptone Bile Agar 胰蛋白胨胆盐琼脂 250

Anti-ADAM10/MADM/CD156c  去整合素样金属蛋白酶10抗体 用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养(Acumedia方法) Bile Esculin Agar 胆盐七叶苷琼脂 250

Anti-ADAMTS12  整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体 用于奶粉中坂崎杆菌的分离培养(FDA方法) VRBGA Agar VRBG 琼脂 250

Anti-ADH/AVP  抗利尿激素/血管升压素抗体 用于奶粉中坂崎杆菌的纯化培养(FDA方法) TSA agar TSA 琼脂 250

Anti-Adiponectin Receptor 1  脂联素受体-1抗体 用于金黄色葡萄球菌的MPN测定，增菌培养，NaCl浓度可根据需

PBS / TWEEN 20 BUFFER, 20X 500ML 生物技术级

蛋白Marker LOW RANGE PROTEIN MW MARKER 200 μl 生物技术级

中电渗琼脂糖 AGAROSE, MODERATE EEO 100G 生物技术级

中电渗琼脂糖 AGAROSE, MODERATE EEO 25G 生物技术级

高电渗琼脂糖 AGAROSE, HIGH EEO 100G 生物技术级

高电渗琼脂糖 AGAROSE, HIGH EEO 25G 生物技术级

超高电渗琼脂糖 AGAROSE, VERY HIGH EEO 100G 生物技术级

人肺癌细胞；A-427 [A427]超高电渗琼脂糖 AGAROSE, VERY HIGH EEO 25G 生物技术级

低电渗琼脂糖 AGAROSE, LOW EEO, PROTEIN 100G 生物技术级

低电渗琼脂糖 AGAROSE, LOW EEO, PROTEIN 25G 生物技术级

低电渗琼脂糖 AGAROSE, LOW EEO, PROTEIN 5G分装 生物

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。