细胞名称 人胰腺腺泡上皮癌；HPAC 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 传代方法 1:3~1:6传代，3~4天换液1次。 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法（-） STR Amelogenin：X；CSF1PO：13；D13S317：11；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：14；D21S11：30；D2S1338：19，23；D3S1358：15，17；D5S818：12；D7S820：10，12；D8S1179：12，14；FGA：24；TH01：9.3；TPOX：10，11；vWA：15，17； 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 酶A消旋酶抗体 用于食品中沙门氏菌生化试验(FDA标准) Lysine Iron Agar 赖氨酸铁琼脂(LIA) 250 Anti-Amphiphysin 神经元突触前膜蛋白抗体 用于沙门氏的分离培养(MERCK方法) MSRV Medium，Modified 改良MSRV培养基 250 Anti-AMPK alpha 1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 滤膜法食品中沙门氏菌前增菌(SN/T1059.1) SCCRAM Broth SCCRAM肉汤 250 Anti-phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 用于食品中沙门氏菌选择性分离培养(Merck方法) BPL Agar BPL琼脂 250 Anti-AMPK alpha 2 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(Merck方法) BPLS Agar BPLS琼脂 250 Anti-AMPK beta 1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 用于多种标本中沙门氏菌检验选择性分离培养(美国和欧洲检测推荐方法) Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(ISO标准) BPLS Agar，Modified 改良BPLS琼脂 250 Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体 用于动力、吲哚和鸟氨酸试验(FDA方法) MIO Medium MIO培养基 250 Anti-Amylin 糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体 用于食品中致病菌，特别是沙门氏菌分离培养(Merck方法) XLT4 Agar XLT4琼脂 25 ATE 7761-88-8 500G 蛋白组学级 尿素 UREA 57-13-6 1KG 蛋白组学级 尿素 UREA 57-13-6 2.5KG 蛋白组学级 尿素 UREA 57-13-6 500G 蛋白组学级 尿素 UREA, 8M SOLUTION 57-13-6 250ML 蛋白组学级 丹磺酰氯 DANSYL CHLORIDE 605-65-2 10G 蛋白组学级 丹磺酰氯 DANSYL CHLORIDE 605-65-2 5G 蛋白组学级 吐温80 TWEEN 80 9005-65-6 100ML 蛋白组学级 吐温80 TWEEN 80 9005-65-6 1L 蛋白组学级 吐温80 TWEEN 80 9005-65-6 4L 蛋白组学级 CHAPS CHAPS 75621-03-3 10G 蛋白组学级 CHAPS CHAPS 75621-03-3 50G 蛋白组学级 CHAPS CHAPS 75621-03-3 5G 蛋白组学级 人胰腺腺泡上皮癌；HPAC考马斯亮蓝 R-250 COOMASSIE BRILLIANT BLUE R-250 6104-59-2 10G 蛋白组学级 考马斯亮蓝 R-250 COOMASSIE BRILLIANT BLUE R-250 6104-59-2 25G 蛋白组学级 考马斯亮蓝 R-250 COOMASSIE BRILLIANT BLUE R-250 6104-59-2 50G 蛋白组学级 辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 OCTYL-B-D-GLUCOPYRANOSIDE 29836-26-8 1G 蛋白组学级 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
