细胞名称 人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116] 形态特性 实体瘤 生长特性 体内生长 特征特性 利用培养的该细胞系进行裸鼠体内移植,形成实体瘤,冻存;可用于建立人结直肠癌的体内移植模型。 培养条件 - 传代方法 制备成细胞悬液接种至免疫缺陷小鼠。 传代情况 P1 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 - 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 磷酸化β 连环素蛋白抗体 用于布氏菌的选择性分离培养 Brucella Selective Medium 布氏菌选择性培养基 250 Anti-Cateninma gamma gamma连环蛋白抗体 Rv 改良rv培养基 250 anti-Cathepsin B 组织蛋白酶B抗体 用于脆弱拟杆菌群的分离培养 BBE Agar 类杆菌-胆汁-七叶甙(BBE)琼脂 250 Anti-DPP-I 组织蛋白酶C抗体 用于军团菌的选择性分离培养(OXOID方法) BCYE Agar(Legionella Agar) BCYE 琼脂(Legionella 琼脂) 250 anti-Cathepsin E 组织蛋白酶E抗体 发酵蛋白胨 250 Anti-Cathepsin D 组织蛋白酶D抗体 用于念球菌的分离培养和计数(OXOID方法) BIGGY Agar(Nickerson Medium) BIGGY 琼脂 250 anti-Cathepsin L 组织蛋白酶L抗体 用于尿液中微生物的选择性分离培养(OXOID方法) C.L.E.D Medium C.L.E.D 培养基 250 Anti-CTSG/CG 组织蛋白酶G抗体 每支加入100ml C.L.E.D 培养基中 C.L.E.D Medium Supplement C.L.E.D 培养基添加剂 1ml*5支 Anti-Cathepsin K 组织蛋白酶K抗体 用于淋球菌的分离培养(OXOID方法) GC Agar GC琼脂 250 Anti-Cathepsin H 组织蛋白酶H抗体 用于双歧杆菌的分离培养 BLB Medium BLB培养基 250 Anti-CBL2 原癌蛋白CBL2抗体 用于从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌 PEA Agar PEA 琼脂 250g Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗体 用于过程中无菌监测(Acumedia方法) Eugonic Agar 艾格琼脂 250 Anti-phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗体 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) NTM Medium NTM 培养基 250 Anti-RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)CBFA1/ 成骨特异性转录因子抗体 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) Thayer Martin Agar TM培养基 250 Anti-CBP/CREBBP CREB结合蛋白抗体 用于基因工程中酵母菌的发酵培养 YNB Medium YNB 培养基 100 Anti-HP1 gamma 异染色质蛋白1-γ抗体 培养基原材料,提供细菌生长氮源,含色氨酸 Tryptone 胰蛋白胨 250 Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) 磷酸化染色质 PBS片剂 PBS片剂 10片 PBS片 PBS TABLETS, 100 ML 200 Tablets 生物技术级 溴化乙锭溶液 ETHIDIUM BROMIDE 0.625MG/ML 15ML 生物技术级 溴化乙锭溶液 ETHIDIUM BROMIDE 0.625 MG/ML 5ML 生物技术级 碱性品红 BASIC FUCHSIN, CERTIFIED 632-99-5 25G 生物染料级 碱性品红 BASIC FUCHSIN, CERTIFIED 632-99-5 5G 生物染料级 MOPS, Na MOPS SODIUM SALT 71119-22-7 100G 高纯级 MOPS, Na MOPS SODIUM SALT 71119-22-7 250G 高纯级 MOPS, Na MOPS SODIUM SALT 71119-22-7 25G 高纯级 盐酸胍 GUANIDINE HYDROCHLORIDE LOW ASH 技术级 盐酸胍 GUANIDINE HYDROCHLORIDE W/OA 1950-1-1 500G 技术级 人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]盐酸胍 GUANIDINE HYDROCHLORIDE LOW ASH 技术级 盐酸胍 GUANIDINE HYDROCHLORIDE W/OA 50-01-1 5KG 技术级 蛋白酶抑制剂 APROTININ 9087-70-1 10MG 高纯级 蛋白酶抑制剂 APROTININ 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |