细胞名称 人横纹肌肉瘤细胞;TE671 Subline No.2 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞表达N型乙酰胆碱和外周型苯二氮?的受体。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 传代方法 1:3~1:6传代,2~3天换液1次。 传代情况 C4 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:13;D16S539:10,11;D18S51:13;D19S433:11,14;D21S11:28,29;D2S1338:23;D3S1358:15,17;D5S818:10,11;D7S820:8,12;D8S1179:11,15;FGA:20,21;TH01:9.3;TPOX:9;vWA:18; 同工酶 染色体 78~90 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Gelatin Peptone 蛋白胨E BR Anti-CD44/PGP1 CD44抗体 250克 Peptone Special 特殊蛋白胨 BR Anti-CD44v4 CD44V4抗体 250克 胃蛋白胨 胃蛋白胨 BR Anti-CD44v5 CD44V5抗体 100克 Peptonized milk 蛋白胨C BR Anti-CD44v6 CD44V6抗体 500克 Anti-CD44v7 CD44V7抗体 100克 HYLB Broth HYLB肉汤 BR Anti-Anti-CD44v10 CD44V10抗体 250克 NA 普通肉汤琼脂培养基 一般细菌培养 Anti-CD45/B220 白细胞共同抗原抗体 250克 NB 普通肉汤培养基 一般细菌培养 Anti-CD45 CD45单克隆抗体 250克 Peptone Water Medium 胰蛋白胨水培养基 用于靛基质试验 Anti-CD46/MCP 膜辅蛋白抗体 250克 Alkaline Peptone Water 3%氯化钠碱性蛋白胨水 副溶血性弧菌的选择性增菌培养 Anti-CD46/MCP 膜辅蛋白抗体 250克 Strain Store Medium 菌种保存培养基 常用细菌斜面传代 Anti-CD45RO CD45RO抗 250克 Blood Agar Base 血琼脂基础培养基 供分离营养要求较高的致病菌用 Anti-CD48/SLAMF2 CD48抗体 250克 L-G Medium Base,Modified 改良罗氏培养基基础 结核杆菌的培养,计数保存,照光试验,药物敏感性测定及菌型鉴定 Anti-CD58/LFA-3 淋巴细胞功能相关抗原-3抗体 250克 MiddleBrook 7H10 Agar MiddleBrook 7H10琼脂 分枝杆菌的分离培养 Anti-Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗体 250克 MiddleBrook 7H11 Agar MiddleBrook 7H11琼脂 分枝杆菌的分离培养 DNA Marker LOW-RANGE II MARKER *DRYICE* 100 µg 生物技术级 NORTHERN 试剂盒(含膜) TOTAL BLOT NORTHERN KIT W/ MEMBRANE 10 x 10 square cm 0 DNA Marker LOW RANGE III *DRYICE* 100 µg 生物技术级 SOUTHERN 试剂盒(含膜) TOTAL BLOT SOUTHERN KIT W/ MEMBRANE 10 x 10 square cm 0 Tris溶液 TRIS 1.0M PH 7.5 STERILE 500ML 超纯级 BCIP/INT BCIP/INT SUBSTRATE 100ML 生物技术级 Tris溶液 TRIS 1.0M PH 9.0 STERILE 77-86-1 250ML 超纯级 TG-SDS缓冲液,5X 浓缩液 TRIS GLYCINE - SDS 5X 500ML 超纯级 Tris溶液 TRIS 1.0M PH 10.0 STERILE 77-86-1 250ML 超纯级 40%葡萄糖溶液 GLUCOSE 40% (W/V) 492-62-6 100ML 超纯级 PBS溶液 PBS 20X PH 7.5 1L 超纯级 PBS溶液 PBS 20X 500ML 超纯级 IPTG溶液 IPTG 20MG/ML 1ML 超纯级 四环素盐酸盐溶液 TETRACYCLINE 50MG/ML 20ML 超纯级 人横纹肌肉瘤细胞;TE671 Subline No.2硫酸卡那霉素溶液 KANAMYCIN 25 MG/ML 20ML 超纯级 硫酸卡那霉素溶液 KANAMYCIN 50 MG/ML 20ML 超纯级 PBS溶液,含0.05% 吐温20 PBS-TWEEN PH 7.5 1L 超纯级 PBS溶液,含0.05% 吐温20 PBS-TWEE 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |