细胞名称 人肺腺癌细胞；NCI-H2009

形态特性 上皮细胞样

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞1983年建系，源自68岁肺腺癌女性患者的转移淋巴结。

培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 5%FBS；0.005 mg/ml Insulin + 0.01 mg/ml Transferrin + 30nM Sodium selenite + 10 nM Hydrocortisone + 10 nM beta-estradiol + extra 2mM L-glutamine

传代方法

传代情况 P25

冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR Amelogenin：X；CSF1PO：10，12；D13S317：12；D16S539：12；D18S51：14；D19S433：14，16，17；D21S11：29；D2S1338：16，19；D3S1358：16；D5S818：13；D7S820：9，11；D8S1179：10，15；FGA：22；TH01：9.3；TPOX：8；vWA：14；

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

0克 MYP agar base MYP琼脂基础 蜡样芽孢杆菌的固体平板计数

Anti-CK20  细胞角蛋白20抗体 250克 SPS Agar SPS琼脂 产气荚膜梭菌的平板计数

Anti-CK1/8/19  细胞角蛋白1/8/19抗体 250克 Chalmers Agar Modified 改良MC乳酸菌琼脂培养基 用于食品中乳酸菌总数的测定

Anti-CK2  细胞角蛋白2抗体 250克 MRSA MRS琼脂 用于食品中乳酸菌的培养

Anti-CK3  细胞角蛋白3抗体 250克 MRS Lactotacillus Agar Modified 改良MRS琼脂培养基 乳酸菌的测定，双歧杆菌和嗜酸乳酸菌的计数

Anti-CK4  细胞角蛋白4抗体 250克 UBA Medium UBA培养基 啤酒中厌氧菌检测

Anti-CK5  细胞角蛋白5抗体 250克 NBB Agar NBB琼脂 啤酒中厌氧菌检测

Anti-CK7  细胞角蛋白7抗体 250克 Raka-Ray Medium 乳酸菌选择性培养基 啤酒中乳酸菌检测和分离培养

Anti-CK7  抗细胞角蛋白7抗体 250克 LBS Agar 乳酸菌选择性琼脂 用于乳酸杆菌的检测

Anti-CK10  细胞角蛋白10抗体 250克 APT Agar 多功能吐温琼脂 乳酸菌分离培养

Anti-CK5+6  细胞角蛋白5+6抗体 250克 PYG Broth Base PYG液体培养基基础 双岐杆菌增菌培养

Anti-CK6  细胞角蛋白6抗体 250克 Cooked Meat Medium Base 疱肉培养基基础 用于厌氧菌的分离培养

Anti-CK8  细胞角蛋白8抗体 250克 7.5% Sodium Chloride Broth 7.5%氯化钠肉汤 金黄色葡萄球菌选择性增菌

Anti-CKLFSF2  趋化素样因子超家族成员2抗体 250克 Baird Parker Agar Base 贝尔德-帕克琼脂基础 用于金黄色葡萄球菌的分离培养

Anti-CK1+5+10+14  高分子量角蛋白抗体

D-甘露糖 D-MANNOSE 高纯级

D-甘露糖 D-MANNOSE 3458-28-4 500G 高纯级

蛋白Marker PROTEIN MW MARKER HIGH RANGE*DRYICE 0.8ML 生物技术级

蛋白Marker PROTEIN MW MARKER HIGH RANGE*DRYICE 200 µl 生物技术级

蛋白Marker PROTEIN MW MARK. MIDLOW RANGE*DRYIC 1.0ML 生物技术级

蛋白Marker PROTEIN MW MARK. MIDLOW RANGE*DRYIC 200 µl 生物技术级

Big CHAP BIG CHAP 86303-22-2 5G 高纯级

TBE 缓冲液粉末包 TBE POWDER - DISODIUM 2 Pack 超纯级

醋酸钾溶液 POTASSIUM ACETATE, 3M, PH 5.0 100ML 生物技术级

醋酸钾溶液 POTASSIUM ACETATE, 3M, PH 5.0 1L 生物技术级

5.5% GENE-PAGE PLUS, 8 M 尿素 GENE PAGE PLUS 5.5% 8M UREA *CLDPAK 500ML 生物技术级

5.5% GENE-PAGE PLUS, 8 M 尿素 GENE PAGE PLUS 5.5% 8M UREA *CLDPAK 100ML 生物技人肺腺癌细胞；NCI-H2009术级

TES, 钠盐 TES SODIUM SALT 70331-82-7 100G 超纯级

TES, 钠盐 TES SODIUM SALT 70331-82-7 25G 超纯级

硫代甜菜碱 8 SULFOBETAINE 8 15178-76-4 5G 生物技术级

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。