细胞名称 人Burkitt淋巴瘤细胞;Daudi 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 1967年,该细胞系E. Klein 和 G. Klein建系,源于一名16岁患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男性,beta-2-微球蛋白阴性,表达EBNA, VCA,sIg。该细胞携带EB病毒,是一个典型的B淋巴母细胞系,可用于引起白血病机制的研究。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 维持细胞浓度在3×105至2~3×106 cells/ml之间,2~3天换液1次。 传代情况 不详 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:11,12;D16S539:10,12;D18S51:16,18;D21S11:34,35;D3S1358:16,18;D5S818:8,13;D7S820:8,10;D8S1179:14;FGA:21,26;PentaD:10,12;PentaE:9;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:15,17 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-C Peptide C-肽抗体 250克 Semi-Solid Agar 半固体动力培养基 细菌动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等 Anti-CPT1A 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A抗体 250克 Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth 氯化钠结晶紫增菌液 副溶血弧菌的选择性增菌培养 Anti-CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷酸化特异性因子4抗体 250克 Sodium Chloride Sucrose Agar 氯化钠蔗糖琼脂 副溶血性弧菌的选择性分离培养 Anti-Calretinin 钙结合蛋白抗体 250克 Halophilic Bacteria Selective Agar 嗜盐菌选择性琼脂 副溶血性弧菌的选择性分离培养 Anti-Crk p38 /CrkII Crk p38抗体 250克 3.5% NaC1 TSI Agar 3.5%氯化钠三糖铁琼脂 副溶血弧菌生化试验鉴别 Anti-phospho-Crk p38 (Tyr221) 磷酸化Crk p38抗体 250克 Sodium Chloride Blood Agar Base 氯化钠血琼脂基础 副溶血性弧菌的溶血试验 Anti-SLAMF6 SLAMF6抗体 250克 Kligler Iron Agar 霍乱双糖铁琼脂 用于霍乱、副溶弧菌的分离培养 Anti-CRMP2 CRMP2抗体 250克 T1N1 Agar T1N1琼脂 霍乱弧菌的培养 Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) 磷酸化二氢嘧啶酶样2抗体 250克 T1N0 Broth T1N0肉汤 霍乱弧菌的培养 Anti-CRLR/CGRPR1 降钙素基因相关肽1型受体抗体 250克 T1N3 Broth T1N3肉汤 霍乱弧菌的生长试验 Anti-SLAMF7/CD319 SLAMF7抗体 250克 MCPC Medium MCPC培养基 弧菌的分离培养 Anti-CRP C-反应蛋白抗体 250克 PSB 改良磷酸盐缓冲液 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 超纯级 TBE 50x浓缩液 EASY TBE 50X CONCENTRATE-20ML 20X20ML 超纯级 乳糖 LACTOSE 12KG 美国国家处方级 乳糖 LACTOSE 50KG 美国国家处方级 乳糖 LACTOSE 5KG 美国国家处方级, Tris溶液 TRIS 1.5M PH 8.8 77-86-1 500ML 超纯级 Tris溶液 TRIS 0.5M PH 6.8 500ML 生物技术级 Tris溶液 2M TRIS PH 7.8 77-86-1 500ML 超纯级 Tris溶液 2M TRIS PH 7.5 77-86-1 1L 超纯级 ALKALINE PHOSPHATASE PH 9.5 4L 盐酸胍, 8M 溶液 GUANIDINE HCL, 8M SOLUTION 50-01-1 4L 生物技术级 G418硫酸盐, 100mM溶液 G418 ANTIBIOTIC SOLUTION 20ML 生物技术级 HEPES 1 M 无菌溶液, pH 7.3 STERILE HEPES, 1M, PH 7.3 100ML 生物技术级 HEPES 1 M 无菌溶液, pH 7.3 STERILE HEPES, 1M, PH 7.3 500ML 生物技术级 蛋白胨 140 PEPTONE 140 73049-73-7 1KG 细菌学级 人Burkitt淋巴瘤细胞;Daudi蛋白胨 140 PEPTONE 140 73049-73-7 500G 细菌学级 酵母粉 YEAST EXTRACT, BACTERIOLOGICAL 100G 细菌学级 酵母粉 YEAST EXTRACT, BACTERIOLOGICAL 10 KG 细菌学级 酵母粉 YEAST EXTRACT, BA 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |