细胞名称 人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH 形态特性 上皮细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系，它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清，10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况 P(34+5) 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X；CSF1PO:11；D13S317:11；D16S539:8,13；D18S51:13,16；D19S433:13,14；D21S11:31,31.2；D2S1338:17,19；D3S1358:15,16；D5S818:12；D7S820:7,10；D8S1179:15；FGA:23.2,24；TH01:7,10；TPOX:8,11；vWA:14,18 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF Anti-DEK DEK癌基因结合蛋白 250克 SOC Broth SOC肉汤 用于基因工程菌大肠杆菌培养 Anti-Defensin Beta 2/DEFB2 防御素β2抗体 250克 Super Broth 超级肉汤 BR Anti-Defensin Beta 2 防御素β2抗体 250克 Super Agar 超级琼脂 BR Anti-DAP-5/p97 死亡相关蛋白5抗体 250克 TYGPN Medium TYGPN培养基 BR Anti-DAPK1 凋亡相关蛋白激酶1抗体 100毫升 Indian ink 印度墨水 炭疽杆菌检测用配套试剂 Anti-DAPK2 凋亡相关蛋白激酶2抗体 500克 Iodophor 附 炭疽杆菌检测用配套试剂 Anti-DAPK3 凋亡相关蛋白激酶3抗体 2毫升×10支 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex添加剂 添加于200ml CAMPY-CEFEX琼脂基础中 Anti-Deltex-1 DTX1抗体 10毫升×6支 多项目尿液化学分析控制品 多项目尿液化学分析控制品 Anti-envelope glycoprotein (Dengue virus type-2) 登革热病毒抗体 10毫升×8支 Cyanomethemoglobin reference solution 氰化高铁血红蛋白参比液(100g/L) Anti-polyprotein (DHAV) 鸭甲型肝炎A病毒抗体 10毫升×8支 Cyanomethemoglobin reference solution 氰化高铁血红蛋白参比液(150g/L) Anti-Desmin 结蛋白抗体 10毫升×8支 Cyanomethemoglobin reference solution 氰化高铁血红蛋白参比液(4种×2套) Anti-DIO2 脱酶2抗体 10毫升×3支 Ziehl-Neelsen Strain 萋-尼氏染色液 细菌耐酸染色液 M 100ML 生物技术级 dNTP套装 DNTP SET *DRYICE* 1 Kit 生物技术级 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE 5% GENE-PAGE PLUS WITH TTE BUFFER 100ML 生物技术级 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE 5% GENE-PAGE PLUS WITH TTE BUFFER 500ML 生物技术级 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE 5% GENE-PAGE PLUS WITH TTE BUFFER 100ML 生物技术级 LB肉汤 LB BROTH, LENNOX (LURIA-BERTANI) 10 Pack 组织培养级 LB琼脂 LB AGAR, LENNOX FORMULATION 10 Pack 组织培养级 潮霉素B溶液, 50mg/ml HYGROMYCIN B, 50 MG/ML SOLUTION 20ML 超纯级 线性丙烯酰胺,5mg/ml LINEAR ACRYLAMIDE, 5 MG/ML 5X1ML 生物技术级 曲拉通 X-102 TRITON X-102 9002-93-1 100ML 试剂级 曲拉通 X-102 9002-93-1 500ML 试剂级 PCR产物纯化试剂盒 CYCLO-PREP, 2 IN 1 ISOLATION KIT 50 reactions 生物技术级 0.1X SSPE 缓冲液,含 0.2% SDS 0.1X SSPE W/ 0.2% SDS 1L 超纯级 10X SSC 缓冲液,含 0.5% SDS 10X SSC BUFFER W/ 0.5% SDS 1L 超纯级 SSC,含 1% 十二烷基肌氨酸钠 20X SSC BUFFER W/ 1% SARCOSYL 1L 超纯级 人神经母细胞瘤细胞；SK-N-SH莫能菌素,钠盐 MONENSIN, SODIUM SALT 22373-78-0 1G 超纯级 莫能菌素,钠盐 MONENSIN, SODIUM SALT 22373-78-0 500MG 超纯级 D-环丝氨酸 D-CYCLOSERINE 68-41-7 1G 超纯级 盐酸金霉素 CHLORTETRACYCLINE HYDROCHLORIDE 64-72-2 25G 美国药典级 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
