细胞名称 人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1 形态特性 上皮细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 CFPAC-1是胰腺管腺癌细胞系,建自26岁白人男性囊性纤维变性(CF)的肝转移灶。 该细胞系表达囊性纤维变性跨膜调节因子(CFTR)。 形态为上皮样且顶端微绒毛极化。该细胞表达胰腺管细胞特征性的细胞角蛋白和癌胚抗原。倍增时间为30-32小时。 它是亚3倍体的细胞系,36%的细胞的染色体模式数为75。 该细胞传代至24代时在无胸腺小鼠中致瘤。 培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 优质胎牛血清,10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。4-5天长满。 传代情况 P(20+5) 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:12;D16S539:9,11;D18S51:12;D19S433:13,15;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:16;D5S818:10,11;D7S820:8,10;D8S1179:11,15;FGA:21,22;TH01:8;TPOX:8;vWA:17 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF inin 甲型流感病毒血凝素抗体 Anti-Hemagglutinin (H2N2) 流感病毒血凝素抗体(H2N2) Anti-Histone H2A 组蛋白H2AX抗体 Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) 磷酸化组蛋白H2AX抗体 Anti-Histone H2B 组蛋白H2B抗体 Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型流感病毒血凝素抗体 Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型流感病毒血凝素抗体 Anti-Haase 透明质酸酶/玻璃酸酶抗体 Anti-HADHSC (human) 短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体(人) Anti-HADHSC (rat, mouse) 短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体(大鼠,小鼠) Anti-HSA 人血清白蛋白单克隆抗体 Anti-KCNH1/EAG1 钾离子通道蛋白EAG1抗体 Anti-HERG/KCNH2/ERG 特异性钾离子通道蛋白抗体 Anti-HAVCR1/TIM1 甲型肝炎病毒细胞受体1 Anti-HA tag HA tag标签抗体 Anti-HA tag HA tag标签抗体 Anti-HA tag HA tag标签单克隆抗体 Anti-HAI-1 肝细胞生长因子激活物抑制剂抗体 Anti-HBsAg 人乙肝表面抗原抗体(包被) Anti-HBA1/Alpha globin 血红蛋白α1抗体 Anti-hHb 人血红蛋白单克隆抗体 Anti-HBsAg 人乙肝表面抗原抗体 0MG/ML *DRYICE* 2x0.5ML 0 RNA贮存液 RIBORESERVE RNA STORAGE SOLUTION 12x1ML 0 RNA贮存液 RIBORESERVE RNA STORAGE SOLUTION 50ML 0 TE缓冲液 TE BUFFER PH 7.0 12x1ML 0 TE缓冲液 TE BUFFER PH 7.0 50ML 0 DNA聚合酶混合物 EXTENDER DNA POLYMERASE BLEND, 500U KIT 0 RiboZol? Plus RNA纯化试剂盒 RIBOZOL PLUS RNA PURIFICATION KIT KIT 0 EZ-Vision? Two DNA染料 EZ-VISION TWO DNA DYE & BUFFER, 6X KIT 生物技术级 RIPA 裂解缓冲液 RIPA LYSIS BUFFER 100ml 生物技术级 无血清细胞冻存培养基(RPMI) SeraFree? Cryopreservation Media N/A 50ml 组织培养级 无血清细胞冻存培养基(RPMI) SERAFREE CRYOPRESERVATION MEDIA 6 x 5 ml 组织培养级 UnDo X光片背景消除试剂 UNDO X-RAY FILM BACKGROUND REDUCER KIT 0 无血清细胞冻存培养基(DMEM) SERAFREE DMEM CRYOPRESERVATION MEDIA 50 ml 组织培养级 无血清细胞冻存培养基(DMEM) SERAFREE DMEM CRYOPRESERVATION MEDIA 6x5ml 组织培养级 IPTG, 非动物源 IPTG (NAO) 367-93-2 10 g 高纯级 人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1IPTG, 非动物源 IPTG (NAO) 367-93-1 1 g 高纯级 十八水硫酸铝 ALUMINUM SULFATE OCTADECAHYDRATE 100G 十八水硫酸铝 ALUMINUM SULFATE OCTADECAHYDRATE 500G X-GAL-IPTG 即用型溶液 X-GAL 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |