细胞名称 人胰腺癌细胞;AsPC-1 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 一个胰腺癌病人的腹水中的细胞移植到裸鼠后建立了这个细胞株。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D13S317:9,12;D16S539:11;D18S51:18;D19S433:14;D21S11:28,30;D2S1338:22,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:12,13;D8S1179:13,15;FGA:24;TH01:7,9.3;TPOX:8,10;vWA:17 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-Phospho-MARCKS (Ser152/156) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体 Anti-Phospho-MARCKS (Ser162) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体 Anti-MAD1 Mad1抗体 Anti-MAdCAM-1 粘膜血管定居因子抗体 Anti-DAXX Fas相关死亡结构域蛋白抗体 Anti-Phospho-FADD (Ser191) 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体 Anti-Mafa v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体 Anti-MAFbx/Fbx32 泛素蛋白连接酶抗体 Anti-MAG-a/b 髓鞘相关糖蛋白a/b抗体 Anti-MAG-a/L-MAG 髓鞘相关糖蛋白-a抗体 Anti-MAGE-1 黑色素瘤相关抗原抗体 Anti-MAGE-A4 黑色素瘤相关抗原4抗体 Anti-MAP1LC3A 自噬微管相关蛋白轻链3抗体 Anti-MO25 alpha/CAB39 钙结合蛋白39抗体 Anti-Mesothelioma 间质细胞蛋白抗体 Anti-TORC1/CRTC1 环腺苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1抗体 Anti-Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体 Anti-MAP3K8/TPL2 丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体 Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化丝裂原活化蛋 YSRIBIO-00433 Homoorientin 异荭草苷即异红草素 纯度: 97% YSRIBIO-00434 Isovitexin(即异牡荆素) 异牡荆苷 纯度: 95% YSRIBIO-00435 isoschaftoside 异夏佛塔苷 纯度: 95% YSRIBIO-00436 icarisid Ⅱ 羊藿次苷II 纯度: 95% YSRIBIO-00437 Tiliroside 银椴苷 纯度: 97% YSRIBIO-00438 Ginkgolic Acid (C15:1) 银杏酸(C15:1) 纯度: ≥99% YSRIBIO-00439 Indolol 6-羟基吲哚 纯度: ≥98% YSRIBIO-00440 4-caffeoylquinic Acid 隐绿原酸 纯度: ≥98% YSRIBIO-00441 4-caffeoylquinic Acid 4-咖啡酰奎宁酸 纯度: ≥98% YSRIBIO-00442 PROCYANIDIN B1 原花青素B1 纯度: ≥95% YSRIBIO-00443 Procyanidin B3 原花青素B3 纯度: ≥90% YSRIBIO-00444 Protopseudohypericin 原伪金丝桃素 纯度: ≥95% YSRIBIO-00445 Polygalaxanthone III 远志山酮III 纯度: ≥97% YSRIBIO-00446 Nepetin 泽兰黄酮 纯度: >98% 人胰腺癌细胞;AsPC-1YSRIBIO-00447 AlisolB-23-acetate 泽泻醇B-23-醋酸酯 纯度: ≥97% YSRIBIO-00448 Sweroside 獐芽菜苷 纯度: 98% YSRIBIO-00449 anemarsaponin B 知母皂苷BⅡ 纯度: 97% 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |