细胞名称 人膀胱癌细胞；5637（HTB-9） 形态特性 上皮细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 据报道，该细胞能生成 SCF, IL-1,IL-3,IL-6,G-CSF,GM-CSF等。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10% 传代方法 消化5-10min。1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X；CSF1PO:11；D13S317:11；D16S539:9；D18S51:16,18；D19S433:13,15；D21S11:36；D2S1338:25；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:10,11；D8S1179:10,16；FGA:22TH01:7,9；TPOX:8；vWA:18 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF Anti-Melamine 三聚氰胺抗体 Anti-Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45 黑色素瘤相关抗原/黑色素-A抗体 Anti-MEK1/MAPKK1/MEKK1 MEK1/MAPKK1抗体(N-端) Anti-Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗体 Anti-Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白抗体 Anti-Mfn1 线粒体融合蛋白1抗体 Anti-MGMT O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶抗体 Anti-Metallothionein 金属硫蛋白抗体 Anti-LAMR1 层粘连蛋白受体1抗体（N端） Anti-MTA1 肿瘤转移相关蛋白1抗体 Anti-LAMR1(CT) 层粘连蛋白受体1抗体（C端） Anti-Myf6 生肌调节因子6抗体 Anti-LAMR1 层粘连蛋白受体1单克隆抗体 Anti-MICA/MHC I MHC I类链相关蛋白A/组织相容性复合物1抗体 Anti-Microsporidia protien 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体 Anti-Midnolin isoform Protein 1 中脑核仁蛋白1抗体 Anti-MIDN 中脑核仁蛋白抗体 Anti-Midkine 中期因子/肝素结合生长因子抗体 Anti-MLCK 肌球蛋白轻链激酶抗体 Anti-MLK3 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体 Anti-Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体 Anti-MYL1/MYL2 肌球蛋白轻链1/2抗体 Anti-Phospho-MYL(Ser19) 磷酸化肌球蛋白轻链 骆驼蓬碱 纯度： >95% 甘草次酸 纯度： >95% YSRIBIO-00516 18β -Glycyrrhetinic acid 18β-甘草次酸 纯度： >95% YSRIBIO-00517 1-Octacosanol 蒙旦醇 纯度： >95% YSRIBIO-00518 1-Octacosanol 普利醇 纯度： >95% YSRIBIO-00519 3-3'-di-O-methyl ellagic acid-4' -O-β-D-xylopyranoside "3,3'-二甲氧基鞣花酸-4-O-β-D-吡喃木 糖苷" 纯度： >95% YSRIBIO-00520 3-O-Acetylboswellic acid (α+β) 乙酰基-alpha+beta-乳香酸 纯度： >95% YSRIBIO-00521 3-O-Methylellagic acid 3-甲基鞣花酸 纯度： >95% YSRIBIO-00522 7-O-Methylwogonin 5-羟基-7,8-二甲氧基黄酮 纯度： >95% YSRIBIO-00523 Allylpyrocatechol 黄纯度： >95% YSRIBIO-00524 Allylpyrocatechol -3,4-diacetate 3，4-烯丙基焦儿茶酚双醋酸酯 纯度： >95% YSRIBIO-00525 Anethole 反-茴香脑 纯度： >95% YSRIBIO-00526 ARJUNGENIN 2alpha,19alpha,23-三羟基齐墩果酸 纯度： >95% YSRIBIO-00527 Bacoside-A (Mixture of Bacoside-A3, Bacopaside-II, Jujubogenin isomer of bacopasaponin C & Bacopasaponin C) 苦艾素混合物 纯度： >95% YSRIBIO-00528 ANGELICIN (BAKUCHICIN) 白芷素 纯度： >95% YSRIBIO-00529 Boswellic acid (α+β) (α+β)乳香酸 纯度： >95% YSRIBIO-00530 Caryophyllene 石竹烯 纯度： >95% YSRIBIO-00531 CATECHIN-5-O-GALLATE 儿茶素没食子酸酯 纯度： >95% YSRIBIO-00532 Cirsilineol 甲基条叶蓟素 纯度： >95% YSRIBIO-00533 Citronellol 香茅醇 纯度： >95% YSRIBIO-00534 Citronellol 3,7-二甲基-6-辛烯-1-醇 纯度： >95% YSRIBIO-00535 Docosyl caffeate 咖啡酸二十二酯 纯度： >95% YSRIBIO-00536 Eclalbasaponin II 墨旱莲皂苷II 纯度： >95% YSRIBIO-00537 Eclalbosaponin I 墨旱莲皂苷I 纯度： >95% 人膀胱癌细胞；5637（HTB-9）YSRIBIO-00538 Elemolic acid (α+β) (α+β) -岚香酮酸 纯度： >95% YSRIBIO-00539 Elemonic acid (β) β-岚香酮酸 纯度： >95% YSRIBIO-00540 Estragole 4-烯丙基苯甲醚 纯度： >95% YSRIBIO-00541 Geranyl acetate 醋酸香叶酯 纯度： >95% 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
