细胞名称 人T淋巴细胞白血病细胞;A3  形态特性 淋巴母细胞  生长特性 悬浮生长  特征特性 A3亚克隆来自Jurkat细胞系。 用Fas抗体处理Jurkat细胞,用有限稀释法获得一个细胞系,此细胞系对Fas介导的凋亡产生自发抗性的比例较低。 得到的亚克隆对Fas-介导的凋亡十分敏感。 挑选对新霉素具有抗性的野生型A3细胞,并三次用移码突变诱变剂ICR-191进行处理以分离具有抗Fas抗体杀伤的隐性突变体。  培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%  传代方法 1:2。3天内可长满。  传代情况 PN5  冻存条件 *培养基+8%DMSO  支原体检测 阴性  STR  同工酶  染色体  产品图片:
   细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用:  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格:  250g 作用:  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用:  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用:  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用:  加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用:  可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用:  试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用:  每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用:  每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用:  每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用:  每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-NRSF/REST  神经元抑制蛋白抗体  Anti-NSBP1  核小体结合蛋白1抗体  Anti-NSE  神经元特异性烯醇化酶抗体  Anti-NT-3  神经营养因子-3抗体  Anti-NT-4/NT-5  神经生长因子4/5抗体  Anti-MT-ND1  NADH复合体1抗体  Anti-NTCP  钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白  Anti-Neurturin  神经生长因子抗体  Anti-Ntn1  轴突导向因子1抗体  Anti-Nur77/GFRP  孤儿核受体蛋白Nur77抗体  Anti-Phospho-Nur77 (Ser351)  磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体  Anti-NuMA  核有丝分裂器NuMA蛋白抗体  Anti-Phospho-NuMA (Ser395)  磷酸化核有丝分裂器NuMA蛋白抗体  Anti-NUMB  膜相关蛋白Numb抗体  Anti-Phospho-Numb (Ser276)  磷酸化膜相关蛋白Numb抗体  Anti-Nurr1  核受体相关因子-1抗体  Anti-OAS1  寡腺苷酸合成酶-1 100mg L-丙氨酸 含量测定 140680-201002  100mg L-缬氨酸 含量测定 140681-200401  100mg L-苏氨酸 含量测定 140682-200401  100mg L-异亮氨酸 含量测定 140683-200401  100mg 甲硫氨酸 含量测定 140684-200401  100mg 精氨酸 含量测定 140685-201003  100mg L-色氨酸 含量测定 140686-200401  100mg L-亮氨酸 含量测定 140687-200401  100mg L-丝氨酸 含量测定 140688-200401  100mg L-甘氨酸 含量测定 140689-200401  100mg L-谷氨酸 含量测定 140690-200802  100mg L-门冬氨酸 含量测定 140691-200401  200mg 云芝胞内糖肽 鉴别 140692-200301  100mg L-盐酸组氨酸 含量测定 140693-200401  2ml 脑蛋白水解物 供鉴别用 140697-200602  100mg 盐酸半胱氨酸 供鉴别与 140699-201001  25mg 舍雷肽酶 鉴别 140700-200401  人T淋巴细胞白血病细胞;A315mg 甘精胰岛素 含量测定 140701-20040  100mg N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 含量测定 140702-200501  100mg 去羟肌苷 含量测定 140703-200401  700mg 琥珀酰明胶 含量测定 140704-200401  操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。  |