细胞名称 人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480] 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌,而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。 该细胞CSAp和直肠抗原3阴性;角蛋白阳性;p53基因第273位密码子的G →A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代;细胞p53蛋白表达水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis 和fos的表达呈阳性;未检测到癌基因N-myc的表达;不表达Matrilysin(一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶)。有报道称该细胞表达GM-CSF。ras 培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS 传代方法 1:2~1:8传代;1~2天换液1次。 传代情况 PN 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X;CSF1PO:13,14;D13S317:12;D16S539:13;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:30,30.2;D2S1338:17,24;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:8;D8S1179:13;FGA:24;TH01:8;TPOX:11;vWA:16 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-FAM3A 胰腺衍生因子抗体 Anti-PAP2c 磷脂酸磷酸酶2C抗体 Anti-PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受体-1抗体 Anti-PAR-2 蛋白酶激活受体-2抗体 Anti-PAR4 蛋白酶活化受体4抗体 Anti-Phospho-PAR4 (Thr163) 磷酸化蛋白酶活化受体4抗体 Anti-Parkin protein 帕金蛋白抗体 Anti-PARP 多腺苷二磷酸多聚酶抗体 Anti-PARP (N-Terminus) 多腺苷二磷酸多聚酶抗体(N端) Anti-PAX1 配对盒基因1抗体 Anti-PAX2 配对盒基因2抗体 Anti-PAX3 配对盒基因3抗体 Anti-PAX5 配对盒基因5抗体 Anti-PAX7 配对盒基因7抗体 Anti-PAX8 配对盒基因8抗体 Anti-PAX9 配对盒基因9抗体 Anti-PBK/TOPK PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体 Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) 磷酸化PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体 Anti-Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体 Anti-Phospho-Paxillin (Tyr118) 磷酸化桩蛋白Paxillin抗体 Anti-P-cadherin P-钙粘附分子抗体 171261-200701 100mg ▲地佐辛 UV法含量测定 171262-200901 100mg (+)地佐辛 有关物质 171263-201001 100mg ▲咪达唑仑 HPLC法含量测定 171265-201001 50mg/支 2-氨基-5-硝基二苯酮(硝西泮杂质) 有关物质 171267-201001 50mg/支 2-氨基-5-氯二苯酮(氯氮卓杂质Ⅰ) 有关物质 171268-201001 20mg N-脱烷基西泮(咪达唑仑杂质) 有关物质 171270-201001 10-姜酚 10-Gingerol ≥95% 10-羟基喜树碱 10-Hydroxy camptothecin "≥95% " 10-脱乙酰巴卡丁III 10-Deacetylbaccatine III "≥99% " 10-硝基喜树碱 10-Nitro Camptothecin "≥97% " 11-氧-罗汉果皂甙V 11-oxo-mogroside V ≥98% 13-乙酰基-9-羟基巴卡丁III 13-Acetyl-9-dihydrobaccatin III "≥98% " 18B-甘草次酸 18-beta-Glycyrrhetinic acid 97% 1-二十八烷醇 1-Octacosanol "≥95% " 人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480]1-脱氧野尻霉素 1-Deoxynojirimycin "≥95% " "1-乙酸基-5-去乙酰基-巴卡亭 I " 1-acetoxy-5-deacetyl-baccatin I ≥98% 2,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷 2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside ≥98% 20(22)-烯-原人参二醇 20(22)-ene-PPD ≥97% 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |