细胞名称 人肺腺癌细胞;NCI-H1395 形态特性 上皮细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 这株细胞是1986年4月建株的。患者吸烟。 每年15包。 ATCC CRL-5957是一株来源于同一患者的类淋巴母细胞。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10% 传代方法 消化5分钟。1:2。5-6天长满。 传代情况 P(23+5) 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:10,14;D16S539:11,13;D18S51:12,14;D19S433:13,16;D21S11:29;D2S1338:17,24;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:12,14;FGA:18,23;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:14,17 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 6抗体 Anti-TSARG7 发生相关的新基因抗体 Anti-CIDEB CIDEB抗体 Anti-Tsg101 tsg101抗体 Anti-TSHB 促甲状腺素抗体 Anti-TSHB 促甲状腺素单克隆抗体 Anti-TSHR 促甲状腺素受体抗体 Anti-TSHR (CT) 促甲状腺素受体抗体(C端) Anti-TSHR (NT) 促甲状腺素受体抗体(N端) Anti-TSHR 促甲状腺素受体抗体 Anti-TSLC1 肺癌肿瘤阻抑基因1抗体 Anti-TSLP 胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体 Anti-CRLF2 胸腺基质淋巴细胞生成素受体抗体 Anti-TSP-1/THBS1 凝血酶敏感蛋白1抗体 Anti-TTF-1 甲状腺核转录因子-1抗体 Anti-TTF-2 甲状腺转录因子-2抗体 Anti-Tubulin-alpha 微管蛋白抗体 Anti-Tubulin- Beta 微管蛋白抗体(免疫组化用抗体) Anti-Tubulin- Beta/Tuj-1 微管蛋白抗体(免疫组化用抗体) Anti-gamma tubulin 微管蛋白-gamma抗体 Anti-Tumstatin 肿瘤抑素抗体 Anti-Tubb3 微管蛋白β3抗体 Anti-TWIST protein TWIST蛋白抗体 Anti-Tuberin/TSC2 马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Tyk2/Non receptor tyrosine protein ki 20mg/支 氯化两面针碱 Nitidine chloride 13063-04-2 20mg/支 高三尖杉酯碱 Homoharringtonine 26833-87-4 20mg/支 芦竹碱 Gramine 克胺; 3-二甲氨基甲基吲哚; 格胺 87-52-5 20mg/支 利血平 Reserpine 蛇根草素; 蛇根碱; 血安平; 利舍平 50-55-5 20mg/支 白杨素 Chrysin 柯因; 5,7-白杨黄素; 金黃酮 480-40-0 10mg/支 石榴皮鞣素 Punicalin 安石榴磷 65995-64-4 20mg/支 喜树碱 Camptothecine 2114454 续随二萜醇 千金子二萜醇 Lathyrol 34420-19-4 20mg/支 龙脑 Borneol 天然龙脑,内有三个成份 507-70-0 20mg/支 5-羟甲基糠醛 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde 67-47-0 20mg/支 β-胡萝卜素 β-Carotene 7235-40-7 20mg/支 百秋李醇 Patchouli alcohol 虎尾草醇; 广藿香醇 5986-55-0 20mg/支 去氢木香内酯 Dehydrocostus Lactone 477-43-0 20mg/支 木香烃内酯 Costundide 553-21-9 20mg/支 补骨脂素 Psoralen 制斑素 66-97-7 20mg/支 异补骨脂素 Angelicin 523-50-2 20mg/支 果糖 Fructose 7660-25-5 20mg/支 芒果苷 Mangiferin 芒果甙 4773-96-0 20mg/支 新芒果苷 Neomangiferin 新芒果甙 64809-67-2 人肺腺癌细胞;NCI-H139520mg/支 DL-薄荷醇 DL-Menthol 89-78-1 20mg/支 酪醇 Tyrosol 对羟基苯乙醇; 4-羟基苯乙醇 501-94-0 20mg/支 (R型)人参皂苷Rh1 20(R)Ginsenoside Rh1 20mg/支 滨蒿內酯 Scoparone 6,7-二甲氧基香豆素; 香豆素二甲醚 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |