细胞名称 人红系白血病细胞;TF-1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞系1987年由Kitamura T等建立,源于一名35岁日本男性的肝素化骨髓抽取样本,该患者具有严重的全血细胞减少症。细胞生长*依赖于IL-3或GM-CSF,对IL-5无反应。多种淋巴因子和细胞因子对该细胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。该细胞不表达血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由该细胞的形态和细胞化学特征及珠蛋白基因的组成性表达,显示该细胞属于红系。氯高铁血红素和δ氨基乙酰丙酸诱导细胞合成血红蛋白,TPA刺激细胞向巨噬细胞样细胞分 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;8ng/ml rHUGM-csf 传代方法 维持细胞浓度在3×104~5×105 cells/ml;2~3天换液1次。 传代情况 U 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-ANG-2/FITC 荧光素标记血管生成素-2抗体IgG Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3/FITC 荧光素标记锚定蛋白G抗体IgG Anti-ANGPTL1/ANG-1 /FITC 荧光素标记血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗体IgG Anti-ANGPTL2/ANG-2 /FITC 荧光素标记血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2抗体IgG Anti-ANGPTL4/ANG-4 /FITC 荧光素标记血管位蛋白样4/血管生成素样蛋白-4抗体IgG Anti-Annexin I/FITC 荧光素标记人、大、小鼠膜粘连蛋白 I抗体IgG Anti-Annexin II/FITC 荧光素标记膜粘连蛋白-2抗体IgG Anti-Annexin III /FITC 荧光素标记膜粘连蛋白 Ⅲ抗体IgG Anti-Annexin IV /FITC 荧光素标记膜粘连蛋白 Ⅳ抗体IgG Anti-Annexin V/FITC 荧光素标记重组膜粘连蛋白-5(人)抗体IgG Anti-Annexin VI/FITC 荧光素标记膜粘连蛋白 VI抗体IgG Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 荧光素标记按蚊抗体IgG Anti-ANP/FITC 荧光素标记抗心钠肽(心钠素)抗体IgG Anti-Anthrax/FITC 荧光素标记炭疽菌抗体IgG Anti-Anthrax/FITC 荧光素标记炭疽菌抗体(采用活疫苗制备)IgG Anti-ANXA1(Annexin A1)/FITC 荧光素标记膜粘连蛋白A1抗体IgG Anti-AP/ALP/FITC 荧光素标记抗碱性 110776-200402 香草酸 对照品 含量测定 50mg 110777-200405 柴胡皂苷a 对照品 含量测定 20mg 110778-200404 柴胡皂苷d 对照品 含量测定 20mg 110780-200405 氧化苦参碱 对照品 含量测定 20mg 110781-200512 黄芪甲苷 对照品 含量测定 20mg 110782-200301 断血流皂苷A(醉鱼草皂苷 Ⅳb) 对照品 TLC法含量测定 20mg 110783-200503 斑蟊素 对照品 含量测定 30mg 110784-200303 槐定碱 对照品 鉴别 20mg 110785-200203 獐牙菜苦苷 对照品 鉴别 20mg 110786-200503 肉桂酸 对照品 含量测定 100mg 110787-200102 芦荟苷 对照品 含量测定 20mg 110788-9202 桉油精 对照品 含量测定 0.1ml 110789-9704 檀香油 对照品 鉴别 0.1ml 人红系白血病细胞;TF-1110790-200202 4-甲氧基水 对照品 含量测定 20mg 110791-9102 对二甲氨基苯 对照品 含量测定 100mg 110792-200503 对羟基苯甲酸丁酯 对照品 含量测定 100mg 110793-200504 防己诺林碱 对照品 含量测定 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |