细胞名称 人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1 形态特性 上皮细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 DLD-1 是1977-1979年间D.L. Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。 在ATCC和其它地方进行的DNA fingerprinting和染色体组型分析表明这株细胞与HCT-15 (CCL-225)相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。 他们的遗传起源可通过DNA fingerprinting证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记*改变或数目上*改变。 细胞的CSAp阴性(CSAp-)。 DLD-1 细胞的 p53 抗原表达呈阳性(p53 抗原产生了一个C -> 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清，10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:13；D7S820:10,12；D8S1179:15；FGA:22；TH01:7,9.3；TPOX:8,11；vWA:18,19 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 水通道蛋白-7抗体IgG Anti-AQP9/FITC 荧光素标记水通道蛋白-9抗体IgG Anti-AR/FITC 荧光素标记雄激素受体抗体IgG Anti-AKR1B1/ADR/FITC 荧光素标记醛糖还原酶抗体IgG Anti-phospho-AR ( p-Ser580)/FITC 荧光素标记磷酸化雄激素受体抗体IgG Anti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC 荧光素标记磷酸化雄激素受体抗体IgG Anti-AR Alpha1/FITC 荧光素标记α1肾上腺素能受体抗体IgG Anti-ARC/FITC 荧光素标记ARC抗体IgG Anti-ARF6/FITC 荧光素标记ADP核糖基化因子6抗体IgG Anti-arfaptin 1/FITC 荧光素标记ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体IgG Anti-arfaptin 2/FITC 荧光素标记ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体IgG Anti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC 荧光素标记磷酸化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体IgG Anti-ARHI/FITC 荧光素标记ARHI蛋白抗体IgG Anti-ARIP2a/FITC 荧光素标记激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗体IgG Anti-ARIP2B/FITC 荧光素标记激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体IgG Anti-Aromatase P450/FITC 荧光素标记芳香化酶蛋白抗体IgG Anti-Aromatase P450/FITC 荧光素标记芳香化酶/细胞色素P450/P450抗体IgG Anti-ART/FITC 荧光素标记胶质细胞系源性 mg 110837-200304 异嗪皮啶 对照品 含量测定 20mg 110838-9903 茴香醛 对照品 鉴别 1ml 110839-200403 辣椒素 对照品 鉴别 20mg 110841-200404 拟人参皂苷F1l 对照品 鉴别 20mg 110842-200504 野黄芩苷 对照品 含量测定 20mg 110843-9501 联苯 对照品 含量测定 100mg 110844-200404 2，3，5，4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 对照品 含量测定 20mg 110846-200405 牛磺鹅去氧胆酸钠 对照品 鉴别 20mg 110849-200004 木香挥发油 对照品 鉴别 0.1ml 110850-200303 杜鹃素 对照品 鉴别 20mg 110851-200403 β-谷甾醇 对照品 鉴别 20mg 110852-200305 隐丹参酮 对照品 含量测定 20mg 110853-200402 原阿片碱 对照品 含量测定 20mg 110854-200305 脱水穿心莲内酯 对照品 含量测定 20mg 110855-200506 丹参素钠 对照品 含量测定 20mg 110856-200203 水飞蓟宾 对照品 含量测定 20mg 110857-200507 五味子醇甲 对照品 含量测定 20mg 人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1110858-200202 虫草素 对照品 鉴别 20mg 110859-200502 湖贝甲素 对照品 含量测定 20mg 110860-200406 异鼠李素 对照品 含量测定 20mg 110861-200405 山柰酚（山柰素） 对照品 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
