细胞名称 人卵巢癌细胞;SK3R-PTX 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 丹明标记(RBITC)Caspase-3 蛋白抗体(标记抗体) Anti-Caspase-3 p17 subunit/FITC 荧光素标记Caspase-3 p17 subunit蛋白抗体 Anti-caspase-3 p12 subunit /FITC 荧光素标记活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗体IgG Anti-Cystatin 3/CST3/FITC 荧光素标记胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体IgG Anti-Caspase-6 (CT)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(C端)IgG Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)IgG Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)IgG Anti-CASP4/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗体IgG Anti-Caspase-8 /FITC 荧光素标记半胱氨酸蛋白酶8抗体IgG Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 荧光素标记半胱氨酸蛋白酶8相关蛋白2抗体IgG Anti-Caspase-9/FITC 荧光素标记白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgG Anti-Caspase-9/FITC 荧光素标记白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgG Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgG Anti-Caspase-10/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶-10抗体IgG Anti-Caspase-12(hunman)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体(人)IgG Anti-Caspase-12/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体IgG Anti-Caspase-13/FITC 荧光素标记半 哈巴俄甙;哈巴脂苷 19210-12-9 20mg/支 哈巴苷 Harpagide 哈帕苷; 哈帕甙; 瓜钩草苷 1835927 20mg/支 安格洛甙C Angoroside C 安格洛苷C 115909-22-3 20mg/支 10-脱乙酰巴卡亭 10-Deacetylbaccatin III 10-脱巴卡丁Ⅲ 32981-86-5 20mg/支 知母皂苷BII Timosaponin BII 知母皂苷B2 136656-07-0 20mg/支 知母皂苷A3 Timosaponin A3 知母皂苷AⅢ; 知母皂苷A-III 41059-79-4 20mg/支 白当归素 Byakangelicin 比克白芷内酯; 比克白芷素 19573-01-4 20mg/支 去氢钩藤碱 Corynoxeine 柯诺辛因碱 630-94-4 20mg/支 异去氢钩藤碱 Isocorynoxeine 异柯诺辛因碱 51014-29-0 20mg/支 麦冬皂苷D Ophiopogonin D 41753-55-3;945619-74-9;11054-29-8;11088-12-3 10mg/支 巴西苏木素 Brazilin 474-07-7 20mg/支 细叶远志皂苷 Tenuifolin 细叶远志皂甙 20183-47-5 20mg/支 丁溴酸东莨菪碱 Scopolamine butylbromide 丁溴东莨菪碱; 溴丁东莨菪碱 149-64-4 山茱萸苷 20mg/支 莫诺苷 Morroniside 25406-64-8 20mg/支 (R型)人参皂苷Rg2 20(R)Ginsenoside Rg2 20(R)人参皂苷Rg2 "分子式: C42H72O13 分子量: 784 " 20mg/支 商陆皂苷甲 "分子式:C42H72O13 分子量: 784" 人卵巢癌细胞;SK3R-PTX20mg/支 白当归脑 Byakangelicol 26091-79-2 20mg/支 新橙皮苷二氢查尔酮 Neosperidin dihydrochalcone 20702-77-6 20mg/支 马钱苷酸 Loganic acid 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |