细胞名称 人肝癌细胞系；HCCIH03 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 3抗体IgG Anti-CCL28/FITC 荧光素标记粘膜相关上皮趋化因子MEC抗体IgG Anti-CCP/FITC 荧光素标记兔抗瓜氨酸环肽抗体IgG Anti-CCR-1/FITC 荧光素标记趋化因子受体1抗体IgG Anti-CCR-2/5/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体2/5抗体IgG Anti-CCR-2A/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体2A抗体IgG Anti-CCR-2B/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体2B抗体IgG Anti-CCR-3/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体3抗体IgG Anti-CCR-4/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体4抗体IgG Anti-CCR-5/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体5抗体IgG Anti-CCR6/CD196/FITC 荧光素标记趋化因子受体6抗体IgG Anti-CCR-7/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体7抗体IgG Anti-CCR-8 /FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体8抗体IgG Anti-CCR-9/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体9抗体IgG Anti-CCR-10/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体10抗体IgG Anti-CCRK/FITC 荧光素标记细胞周期相关激酶抗体IgG Anti-CD2/FITC 荧光素标记CD2抗体IgG Anti-CD2AP/FITC 荧光素标记白细胞分化抗原CD2AP抗体IgG Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 荧光素标记CD2F-10抗体IgG Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 荧光素标记CD2F 20mg/支 D-松醇 D-Pinitol 10284-63-6 20mg/支 常春藤皂苷元 Hederagenin 常春藤皂甙元 465-99-6 20mg/支 白花前胡醇 Peucedanol 28095-18-3 佛手柑内酯 5-Methoxypsoralen 香柑内酯，5-甲氧基补骨脂素 左旋肉碱 5mg/支 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷 Cyanidin-3-O-glucoside chloride 花青素 7084-24-4 5mg/支 氯化矢车菊素 Cyanidin Chloride 花青素 528-58-5 20mg/支 5-羟色胺酸 5-HTP；5-Hydroxytryptophan 5-羟基色氨酸 56-69-9; 4350-09-8 20mg/支 亥茅酚苷 Sec-O-Glucosylhamaudol 80681-44-3 20mg/支 异鼠李素-3-O-新橙皮苷 Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside 异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷 55033-90-4 20mg/支 紫蓳灵 Corynoline 紫堇醇灵碱 18797-79-0 20mg/支 高丽槐素 Maackiain 马卡因 19908-48-6 20mg/支 秦皮苷 Fraxin 白蜡树苷 524-30-1 20mg/支 奇任醇 Kirenol 奇壬醇 52659-56-0 20mg/支 高良姜素 Galangin 3,5,7-三羟基黄酮 548-83-4 20mg/支 比枯枯灵 (+)-Bicuculline 毕灵碱；荷包牡丹碱；山乌龟碱 485-49-4 20mg/支 异槲皮苷 Isoquercitrin 异栎素；罗布麻甲素；槲皮素-3-O-葡萄糖苷 21637-25-2 人肝癌细胞系；HCCIH0320mg/支 乙酰紫堇灵 Acetylcorynoline 乙酰紫堇醇灵碱 18797-80-3 20mg/支 三叶豆紫檀苷 Trifolirhizin 红车轴草根苷; 红车轴草根甙；三叶豆根苷; 高丽槐素-D-葡萄糖 6807-83-6 20mg/支 苷 Kaempferitrin 山 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
