细胞名称 高转移潜能肝癌细胞；MHCC97H-GFP-LC3 形态特性 上皮细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF G Anti-CMKLR1/CHEMR23/FITC 荧光素标记趋化样因子受体1抗体IgG Anti-C-Myc/MYC/MTLC /FITC 荧光素标记C-Myc致癌基因抗体IgG Anti-c-Myc tag/FITC 荧光素标记c-Myc tag标签抗体IgG Anti-c-Myc tag/HRP 辣根过氧化物酶标记c-Myc tag标签抗体IgG Anti-CNGA2/FITC 荧光素标记抗环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗体IgG Anti-CNP/CNPase /FITC 荧光素标记C型钠尿肽抗体IgG Anti-CNR-1/FITC 荧光素标记钙粘蛋白相关的神经受体1抗体IgG Anti-CNR-2/FITC 荧光素标记钙粘蛋白相关的神经受体2抗体IgG Anti-CNTF/FITC 荧光素标记睫状神经营养因子抗体IgG Anti-CNTFR Alpha/FITC 荧光素标记抗睫状神经营养因子受体α抗体IgG Anti-Collagen I/FITC 荧光素标记抗I型胶原抗体IgG Anti-Collagen II /FITC 荧光素标记抗Ⅱ型胶原抗体IgG Anti-Collagen III /FITC 荧光素标记抗Ⅲ型胶原抗体IgG Anti-Collagen III /FITC 荧光素标记抗Ⅲ型胶原抗体(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)IgG Anti-Collagen IV /FITC 荧光素标记抗IV型胶原抗体IgG Anti-Collagen V /FITC 荧光素标记抗Ⅴ型胶原抗体IgG Anti-Collagen VI /FITC 荧光素标记抗Ⅵ型胶原抗体IgG Anti-Collagen VII /FITC 荧光素标记抗Ⅶ胶原抗体(Ⅶ 11776-200701 20mg 异长春花苷内酰胺 含量测定 2-8℃，避光 111778-200801 20mg 20(S)-人参皂苷Rg2 鉴别 常温，避光 111779-200801 20mg 卫矛醇 鉴别 常温，避光 111781-200901 20mg 3,5-O二咖啡酰基奎宁酸 含量测定 常温，避光 111782-200801 650mg 注射用益气复脉随行对照品(暂行) 指纹图谱 常温，避光 111783-200801 20mg 去乙酰车叶草酸甲酯 含量测定 常温，避光 111786-200801 20mg 7,4'-二羟基黄酮 含量测定 常温，避光 111787-200801 20mg 香叶木素 含量测定 常温，避光 111788-200801 20mg 4'-去甲基鬼臼毒素 含量测定 常温，避光 111792-200901 20mg 杜柳毒苷 含量测定 常温，避光 111793-200901 20mg 杯苋甾酮（暂行） 含量测定 常温，避光 111804-201001 40mg 莰烯 供鉴别用 2-8℃，密封 111805-201001 20mg 相思子碱 供鉴别用 常温，避光 111808-201001 20mg 柳穿鱼黄素 供鉴别用 常温，避光 111815-201001 20mg 苦蒿素 供含量测定 常温，避光 111817-201001 20mg 羌活醇 含量测定 2-8℃，避光 111820-201001 高转移潜能肝癌细胞；MHCC97H-GFP-LC320mg 紫花前胡苷 供鉴别用 常温，避光 111821-201001 20mg 广藿香酮 鉴别 2-8℃，避光 111822-201001 20mg 乔松素 供含量测定用 常温，避光 111829-201001 20mg 桤木酮 含量测定 2-8℃，密封 111830-201001 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
