细胞名称 人结直肠腺癌细胞；HT-29 形态特性 上皮样；多角 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞是1964年由Fogh J用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来，已建株的培养细胞用含血清的McCoy's 5a培养基培养。 该细胞系在裸鼠中成瘤，也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素；表达尿激酶受体，但没有检测到血浆酶原活性；不表达CD4，但细胞表面表达半乳糖神经酰胺（HIV的可能替代受体）。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性；p53基因过表达，并且在273位密码子处发 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS 传代方法 1：3传代；3-4天一次 传代情况 不详 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 荧光法（-） STR Amelogenin：X；D8S1179：10, 16；D21S11：29,30；D7S820：10；CSF1PO：11, 12；D3S1358：15, 17；TH01：6, 9；D13S317：11, 12；D16S539：11, 12；D2S1338：19, 23；D19S433：14；vWA：17, 19；THOX：8, 9；D18S51：13；D5S818：11, 12；FGA：20, 22。 同工酶 染色体 68-72 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF Anti-IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC 荧光素标记白介素17受体抗体IgG Anti-IL-17(Interleukin-17)human/FITC 荧光素标记白介素-17抗体（人）IgG Anti-IL-17RC/IL-17RL/FITC 荧光素标记白介素17受体C抗体IgG Anti-IL-17RD/FITC 荧光素标记白介素17受体D抗体IgG Anti-IL-17RB/FITC 荧光素标记白介素-17B受体抗体IgG Anti-IL-17C/FITC 荧光素标记白介素-17C抗体IgG Anti-IL-17D/IL-27/FITC 荧光素标记白介素-17D抗体IgG Anti-IL-27R/TCCR/FITC 荧光素标记白细胞介素27受体抗体IgG Anti-IL-17E/IL-25/FITC 荧光素标记白介素-17E抗体IgG Anti-IL-17F/IL-24/FITC 荧光素标记白介素-17F抗体IgG Anti-IL-18R Alpha/FITC 荧光素标记白细胞介素-18受体α链抗体IgG Anti-IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 荧光素标记白细胞介素-18受体β链抗体IgG Anti-IL-19/NG.1/FITC 荧光素标记白细胞介素-19抗体IgG Anti-IL-20R Alpha/IL20RA/FITC 荧光素标记白介素20受体α链抗体IgG Anti-IL-20RB/IL-20R2/FITC 荧光素标记白介素20受体β链抗体IgG Anti-IL-20/FITC 荧光素标记白细胞介素-20抗体IgG Anti-IL-21/FITC 荧光素标记白介素21抗体IgG Anti-IL-21R/FITC 荧光素标记白介素21受体抗体IgG Anti-IL-22/ZCYTO18/FITC 荧光素标记白介素-22抗体IgG Anti-IL-22R/IL22RA1/FITC 荧光素标记白介素-22受体抗体IgG Anti-IL-22BP/IL22RA2/FITC 荧光素标记白介素22受体结合蛋白抗体IgG Anti-IL-23/FITC 荧光素标记白介素-23抗体IgG Anti-IL-23R/FITC 荧光素标记抗白介素-23受体抗体IgG Anti-IL-26/AK155/FITC 荧光素标记白介素26抗体IgG Anti-IL-28A/IFNL2/FITC 荧光素标记白细胞介素28A抗体IgG Anti-IL-28B/IL-28C/FITC 荧光素标记白细胞介素28B抗体IgG Anti-IL-29/IFNL1/FITC 荧光素标记白细胞介素29抗体IgG Anti-IL-31/FITC 荧光素标记白细胞介素31抗体IgG Anti-IL-31RA/CRL3/FITC 荧光素标记白介素31受体a抗体 100mg 联苯 含量测定 110843-9501 20mg 2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 含量测定 110844-200908 20mg 牛磺鹅去氧胆酸钠 鉴别 110846-200506 20mg 乙氧基白屈菜红碱 鉴别 110847-200601 20mg 氯化两面针碱 含量测定 110848-200603 0.1ml 木香挥发油 鉴别 110849-200004 20mg 杜鹃素 含量测定 110850-200604 20mg β-谷甾醇 鉴别 110851-200605 20mg 隐丹参酮 含量测定 110852-200806 20mg 原阿片碱 含量测定 110853-200402 20m 脱水穿心莲内酯 含量测定 110854-200306 20mg 丹参素钠 含量测定 110855-200809 20m 水飞蓟宾 含量测定 110856-200604 20mg 五味子醇甲 含量测定 110857-200709 20mg 虫草素 鉴别 110858-200202 20mg 湖贝甲素 TLC扫描法 含量测定 110859-200301 20mg 异鼠李素 含量测定 110860-200608 20mg 山柰酚（山柰素） 含量测定 110861-200808 20mg 银杏内酯 A 含量测定 110862-200608 20mg 银杏内酯 B 含量测定 110863-200508 20mg 银杏内酯 C (暂行) 含量测定 110864-200505 20mg 白果内酯 含量测定 110865-200605 700mg 银杏叶对照提取物 鉴别 110866-200803 20mg 丹参酮 I 鉴别 110867-200205 100mg 三七总皂苷 含量测定 110870-200001 人结直肠腺癌细胞；HT-2950mg 三七茎叶皂苷 鉴别 110871-200201 100mg 精氨酸 鉴别 110872- 100mg 丙氨酸 鉴别 110873-9802 100mg 缬氨酸 鉴别 110874-200203 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
