细胞名称 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1 形态特性 成纤维细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞有多个亚克隆,可以作为体外研究成骨细胞分化的良好模型,尤其是ECM信号通路的作用。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 传代方法 1:6~1:8传代;2~3天1次。 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 60~70 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 长因子抗体IgG Anti-Nurr1/FITC 荧光素标记核受体相关因子-1抗体IgG Anti-Nur77/GFRP/FITC 荧光素标记孤儿核受体蛋白Nur77抗体IgG Anti-Phospho-Nur77 (Ser351) /FITC 荧光素标记磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体IgG Anti-OAS1/FITC 荧光素标记寡腺苷酸合成酶-1抗体IgG Anti-OAT-1/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗人)抗体IgG Anti-OAT-1/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗大、小鼠)抗体IgG Anti-OAT-3/FITC 荧光素标记阴离子转运蛋白-3抗体IgG Anti-OAT4L/URAT1 /FITC 荧光素标记尿酸盐重吸收转运子1抗体IgG Anti-obestatin/Ghrelin/GHRP /FITC 荧光素标记肥胖抑制素抗体IgG anti-OCLN(Occluding)/FITC 荧光素标记人咬合蛋白抗体IgG Anti-ODC/FITC 荧光素标记抗鸟氨酸脱羧酶抗体IgG Anti-OCT1 /FITC 荧光素标记阳离子转运器1抗体IgG Anti-OCT2 /FITC 荧光素标记阳离子转运蛋白2抗体IgG Anti-Oct-4/FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG Anti-Oct-4 /FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG Anti-Omgp /FITC 荧光素标记少突细胞髓磷脂糖蛋白抗体IgG Anti-ompF/FITC 荧光素标记小肠结肠炎耶 8-200401 50mg 间苯二酚 含量测定 常温,避光 100389-200301 100mg 维生素B1 含量测定 常温,避光 100390- 200502 100mg 维生素BT 含量测定 常温,避光 100mg 乙水杨胺 含量测定 常温,避光 100394-200401 100mg 丹蒽醌 含量测定 常温,避光 100398-200701 100mg 氢樟柳碱 含量测定 常温,避光 100399-200601 100mg 顺铂 含量测定 常温,避光 100401-200501 50mg 棓丙酯 含量测定 常温,避光 100407-200301 100mg 氯美扎酮 UV法溶出度检查 常温,避光 100408-200401 100mg 磷酸氢钙 UV法含量测定 常温,避光 100410-200301 100mg 磺胺二甲嘧啶 含量测定 常温,避光 100411-200501 100mg 磺胺脒 HPLC法含量测定 常温,避光 100412-200401 100mg 磺胺醋酰胺 鉴别 常温,避光 100413-200601 50mg 芬布芬 含量测定 常温,避光 100415-200301 100mg 曲克芦丁 含量测定 常温,避光 100416-201004 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1100mg 二羟丙茶碱 含量测定 常温,避光 100417-200501 50mg 茜素双酯 UV法含量测定 常温,避光 100418-200401 50mg 苯甲酸 HPLC含量测定 常温,避光 100419-200301 100mg 盐酸地巴唑 HPLC含量测定 常温,避光 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |