细胞名称 小鼠骨髓瘤细胞；P3/NSI/1-Ag4-1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞系是 P3X63Ag8细胞的非分泌型克隆，可合成Kappa链但不分泌，表达H-2d，不需HAT。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 传代方法 保持细胞密度在1×105～1×106 viable cells/ml之间，每周换液2～3次 传代情况 C2 冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法（-） STR - 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 材 TLC法鉴别 1.5g 120926-200505 肉豆蔻 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120927-200512 当归 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120928-200403 延胡索 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120929-200504 伊贝母 中药对照药材 TLC法鉴别 5.0g 120931-200202 苏合香 中药对照药材 TLC法鉴别 1ml 120932-200405 苍术(茅苍术) 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120933-200303 佛手 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120934-200507 何首乌 中药对照药材 TLC法鉴别 0.5g 120935-200405 羌活(羌活) 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120936-200505 枳实(酸橙) 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120937-200506 关黄柏 中药对照药材 TLC法鉴别 0.5g 120938-200104 蛇胆汁 中药对照药材 TLC法鉴别 10mg 120939-200404 首乌藤 中药对照药材 TLC法鉴别 0.25g 120940-200507 独活(重齿毛当归) 中药对照药材 TLC法鉴别 2.0g 120941-200506 三七 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120942-200505 干姜 中药对照药材 TLC法鉴别 2.0g 120943-200402 广山楂 中药对照药材 TLC法鉴别 4g 120944-200507 天麻 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120945-200406 白芷（杭白芷） 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 120946-9903 西青果 中药对照药材 TLC法鉴别 2.0g 120947-200405 防风 中药对照药材 TLC法鉴别 3.0g 120948-200302 返魂草（麻叶千里光） 中药对 荧光素标记钙结合蛋白S100A8抗体IgG Anti-S100-A9/MRP14/CFAG/FITC 荧光素标记钙结合蛋白S100A9抗体IgG Anti-S100A13/FITC 荧光素标记钙结合蛋白S100A13抗体IgG Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC 荧光素标记磷酸化S6核糖体蛋白抗体IgG Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC 荧光素标记磷酸化S6核糖体蛋白抗体IgG Anti-S100B/FITC 荧光素标记S100B蛋白抗体IgG Anti-S6PDH/FITC 荧光素标记抗6-磷酸山梨醇脱氢酶抗体IgG Anti-SAMDC/AMD1/FITC 荧光素标记S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抗体IgG Anti-SARS S-protein/FITC 荧光素标记非典病毒表面蛋白S抗体IgG Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 荧光素标记SARS抗体IgG Anti-SATB1/FITC 荧光素标记核基质结合区结合蛋白1抗体IgG Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC 荧光素标记磷酸化核基质结合区结合蛋白1抗体IgG Anti-SCF/FITC 荧光素标记干细胞生长因子抗体IgG Anti-SCG3/SgIII /FITC 荧光素标记分泌粒蛋白Ⅲ抗体IgG 小鼠骨髓瘤细胞；P3/NSI/1-Ag4-1Anti-SCN1A/FITC 荧光素标记电压阀门钠通道蛋白a1/癫痫相关蛋白抗体IgG Anti-SCN2A/FITC 荧光素标记电压阀门钠通道蛋白a2/癫痫相关蛋白抗体IgG Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC 荧光素标记电压开启的钠离子通道SCN9AIgG Anti-SCP2/NLTP/FITC 荧光素标记固醇携带蛋白2 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
