细胞名称 小鼠网织细胞性白血病细胞；L615 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 L6565细胞源自L6565白血病小鼠的脾细胞胰悬液。染色体数从38到144不等。电镜观察证明L6565克隆细胞核边界清晰，细胞质中oragnalles和A类C类病毒颗粒丰富。 c-myc和c-fos过量表达。 L6565细胞克隆是一株含RNA病毒的淋巴细胞白血病干细胞。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清，10% 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 疫测定用 320ng/支 150542-0004(原批号：542-0004） 甲胎蛋白 工作标准品 免疫测定用 800ng/661IU/支 150543-0004(原批号：543-0004） 前列腺特异抗原 标准品 免疫测定用 150ng/支 150544-0004(原批号：544-0004） 游离前列腺特异抗原 标准品 免疫测定用 156ng/支 150550-0004(原批号：550-0004） *腺原氨酸 标准品 免疫测定用 50ng/支 150551-0004(原批号：551-0004） 甲状腺素 标准品 免疫测定用 1000ng/支 150552-0004 反*腺原氨酸 标准品 免疫测定用 23ng/支 150553-9911(原批号：521-9911） 人胰岛素C-肽 标准品 免疫测定用 21ng/支 150554-9410 胰高血糖素 标准品 免疫测定用 19μIU/19ng/支 150555-9003 人绒毛膜促性腺激素（曾用名：绒促性素） 标准品 免疫测定用 22.8IU/支 981 细菌内毒素 标准品 细菌内毒素检查 9000EU/支 / 细菌内毒素 工作标准品 细菌内毒素检查 10支/盒 150602-0202 细菌内毒素 精品 可用于建立动物发热模型 1mg/支 / 不锈钢筒 / / 6.3×39cm / 封口膜 / / 卷 / 铝薄纸 / / 卷 / 无热原吸头 / / 200ul，96个/盒 / 无热原吸头 / / 1000ul，96个/盒 / 细菌内毒素检查用水 / / 10ml，10支/盒 / 旋涡混合器 / / 台 171201-200420 吗啡 对照品 含量测定 mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 兔白介素1β IL-6 (Rabbit Interleukin 6) ELISA Kit 兔白介素6 IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit 兔白介素10 TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit 兔子肿瘤坏死因子α TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit 兔子转化生长因子β bFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit 兔子碱性成纤维细胞生长因子 PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit 兔子前列腺素E2 5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 兔子5羟色胺 Beta-EP (Rabbit Beta-Endorphin) ELISA Kit 兔子β内啡肽 NF-κB p65 (Rabbit nuclear factor-κB p65) ELISA Kit 兔核因子κB亚基p65亲和肽 G-CSF (Rabbit Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 兔粒细胞集落刺激因子 Alpha2-AP (Rabbit Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 兔子α2抗纤溶酶 SAA (Rabbit Serum amyloid A) ELISA Kit 兔血清淀粉样蛋白A Hpt/HP (Rabbit Haptoglobin) ELISA Kit 兔结合珠蛋白/触珠蛋白 Plg (Rabbit Plasminogen) ELISA Kit 兔子纤溶酶原 小鼠网织细胞性白血病细胞；L615BMPs (Rabbit bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 兔骨形成蛋白 OPG (Rabbit Osteoprotegerin) ELISA Kit 兔骨保护素 Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit 兔胰淀素 cTn- I (Rabbit cardiac troponin I ) ELISA Kit 兔 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
