细胞名称 杂交瘤;OKT 3 形态特性 淋巴母细胞 生长特性 悬浮生长 特征特性 用人外周血淋巴细胞免疫小鼠。取其脾细胞与P3x63Ag8.U1骨髓瘤细胞融合。 培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 优质胎牛血清,20% 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 20mg 171239-200504 盐酸纳洛酮 对照品 含量测定 50mg 1240-9701 (-)-4,5-α-环氧基-3,14-二羟基吗啡喃-6-酮 对照品 检查 20mg 171244-200001 盐酸对照品 含量测定 20mg 171246-200301 盐酸洛非西定 对照品 含量测定 20mg 171248-200301 氯氮卓 对照品 含量测定 100mg 171249-200301 盐酸纳曲酮 对照品 HPLC法含量测定用 20mg 171250-200401 马来酸咪达唑仑 对照品 UV法含量测定用 50mg 171251-200401 盐酸二氢埃对照品 UV法含量测定用 20mg 171252-200401 酒石酸双氢可待因 对照品 HPLC法含量测定用 50mg 171253-200401 劳拉西泮 对照品 HPLC法含量测定 100mg 171254-200401 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(劳拉西泮杂质B) 对照品 TLC法有关物质检查 100mg 171256-200401 盐酸吗啡 对照品 鉴别 100mg 银杏酸 对照品 含量测定 20mg 32619-42-4 橄榄苦苷 橄榄苦甙 Oleuropein HPLC≥98% 136085-37-5 党参炔苷 党参炔甙 Lobetyolin HPLC≥98% 639426 鼠尾草酸 Carnosic?acid HPLC≥98% 20283-92-5 迷迭香酸 Rosmarinic acid HPLC≥98% 40246-10-4 黄豆黄苷 黄豆黄甙 Glycitin HPLC≥98% 40957-83-3 黄豆黄素 Glycitein HPLC≥98% 552-66-9 大豆苷 大豆甙 Daidzin HPLC≥98% 486-66-8 大豆苷元 大豆甙元;黄豆苷元 Daidzein HP D2D (Rabbit D-Dimer) ELISA Kit 兔子D二聚体 IL-1sR I (Rabbit soluble interleukin-1 receptor I ) ELISA Kit 兔子白介素1可溶性受体I Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) ELISA Kit 兔钩端螺旋体IgG F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2) ELISA Kit 兔凝血酶原片段F1+2 ADM (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子肾上腺髓质素 sEPCR (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子可溶性血管内皮细胞蛋白C受体 Lp- Alpha (Rabbit lipoprotein Alpha) ELISA Kit 兔脂蛋白α Apo-E (Rabbit Apolipoprotein E) ELISA Kit 兔载脂蛋白E apo-B100 (Rabbit apoprotein B100) ELISA Kit 兔载脂蛋白B100 TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) ELISA Kit 兔转化生长因子β2 NOS (Rabbit nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔一氧化氮合成酶 eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔内皮型一氧化氮合成酶 PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA Kit 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体 uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator) ELISA Kit 兔尿激酶型纤溶酶原激活物 杂交瘤;OKT 3hs-CRP (Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 兔超敏C反应蛋白 MMP-1 (Rabbit matrix metalloproteinase 1) ELISA Kit 兔基质金属蛋白酶1 8-epi-PGF2 Alpha (Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha) ELISA Kit 兔8-异构前列腺素 PF-4/CXCL4 (Rabbit Platelet Factor 4) ELISA Kit 兔子 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |