细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;AE-1 形态特性 淋巴母细胞 生长特性 悬浮生长 特征特性 动物用纯化的人红细胞乙酰胆碱脂酶免疫。 脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合。 产生的抗体与人及猴的乙酰胆碱脂酶结合,但反应位点与AE-2(ATCC HB-73)的抗原决定簇不同。 检测发现短肢畸形(鼠痘)病毒阴性。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10% 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 酯甲 Wilforlide A HPLC≥98% 491-70-3 木犀草素 藤黄菌素 Luteolin HPLC≥98% 1268798 木犀草苷 木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青兰苷 Cynaroside HPLC≥98% 149-91-7 没食子酸 3,4,5-三羟基苯甲酸 Gallic acid HPLC≥98% 480-36-4 蒙花苷 Buddleoside HPLC≥97% 138-59-0 莽草酸 Shikimic acid HPLC≥98% 520-36-5 芹菜素 芹黄素;5,7,4'-三羟基黄酮 Apigenin HPLC≥98% 115-53-7 青藤碱 Sinomenine HPLC≥98% 508-02-1 齐墩果酸 土当归酸 Oleanolic acid HPLC≥98% 20977-05-3 七叶皂苷钠 Sodium Aescinate HPLC≥98% 87-99-0 木糖醇 戊五醇;五羟基戊烷;1,2,3,4,5-五羟基戊烷 Xylitol HPLC≥98% 65-19-0 盐酸育亨宾 Yohimbine Hydrochloride HPLC≥98% 20033 烟碱 尼古丁 L-Nicotine HPLC≥98% 485-35-8 金雀花碱 野靛碱 Cytisine HPLC≥98% 64-86-8 秋水仙碱 秋水仙素 Colchicine HPLC≥98% 512-04-9 薯蓣皂苷元 薯蓣皂素;地奥配质 Diosgenin HPLC≥98% 19057-60-4 薯蓣皂苷 薯蓣皂甙; 重楼皂苷III; 重楼皂甙III Dioscin HPLC≥98% 55056-80-9 原薯蓣皂苷 原薯蓣皂甙 Protodioscin HPLC≥98% 484-12-8 蛇床子素 Osthole HPLC≥98% 541-91-3 麝香酮 Muscone GC≥98% 520-18-3 酚 山柰酚 Kaempferol HPLC≥98% 138-52-3 水杨苷 水杨甙;水杨素 D-(?)-Salicin HPLC≥98% 22888-70-6 水飞蓟宾 水飞蓟素;西利马林 Silymarin HPLC≥98% 14259-46-2 芸香柚皮苷 Narirutin HPLC≥98% 23180-57-6 芍药苷 Paeoniflorin HPLC≥98% 6155-35-7 鼠李糖 L-Rhamnose HPLC≥98% 107-43-7 甜菜碱 Betaine HPLC≥98% 590-46-5 盐酸甜菜碱 Betaine hydrochloride HPLC≥98% 57817-89-7 甜菊苷 甜菊糖 Stevios 胃泌素释放肽(抗原) BSA(标准) 牛血清白蛋白(标准) MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘碱性蛋白(多肽)大鼠 MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白(抗原) IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰岛素样生长因子-I(抗原) VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性肠肽 IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰岛素样生长因子-II(抗原) TP-5(Thymopentin) 胸腺五肽 Galanin 神经节肽(抗原) GLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素样肽-2蛋白 ADNP (NAP) (Activity-dependent Neuroprotective protein ) 活性依赖的神经保护肽(抗原) AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin) α-1抗胰糜蛋白酶 AACT protein(Alpha chymotrypsin protein) 胰糜蛋白酶 ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39) 促肾上腺皮质激素(1-39)(抗原) ADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52) 肾上腺髓质素(1-52) ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促肾上腺皮质激素(18-39)(抗原) SP (Substance P) P物质(抗原) Ghrelin 脑肠肽(一种新的生长激素释放肽)多肽抗原 Gastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源) 小鼠杂交瘤细胞;AE-1myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原 Insulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛素蛋白 bovine Insulin protein 牛胰岛素蛋白 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |