细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;BB7.2 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 可产生抗HLA-A2的单克隆抗体。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 宝藿苷VI Epmedin C HPLC≥98% 75330-75-5 洛伐他汀 洛伐司他汀;汀洛伐他丁 Lovastatin HPLC≥98% 485-72-3 芒柄花黄素 刺芒柄花素;芒柄花素 Formononetin HPLC≥98% 69884-00-0 拟人参皂苷F11 Pseudoginsenoside F11 HPLC≥98% 41753-43-9 人参皂苷Rb1 Ginsenoside Rb1 HPLC≥98% 11021-13-9 人参皂苷Rb2 Ginsenoside Rb2 HPLC≥98% 68406-26-8 人参皂苷Rb3 Ginsenoside Rb3 HPLC≥98% 22427-39-0 人参皂苷Rg1 Ginsenoside Rg1 HPLC≥98% 52286-74-5 人参皂苷Rg2 Ginsenoside Rg2 HPLC≥98% 14197-60-5 人参皂苷Rg3 Ginsenoside Rg3 HPLC≥98% 63223-86-9 人参皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 HPLC≥98% 78214-33-2 人参皂苷Rh2 Ginsenoside Rh2 HPLC≥98% 105558-26-7 人参皂苷Rh3 Ginsenoside Rh3 HPLC≥98% 11021-14-0 人参皂苷Rc Ginsenoside Rc HPLC≥98% 51542-56-4 人参皂苷Re Ginsenoside Re HPLC≥98% 52705-93-8 人参皂苷Rd Ginsenoside Rd HPLC≥98% 52286-58-5 人参皂苷Rf Ginsenoside Rf HPLC≥98% 98474-78-3 拟人参皂苷RT5 Pseudoginsenoside RT5 HPLC≥98% 30636-90-9 原人参二醇 Protopanaxdiol HPLC≥98% 1453-93-6 原人参三醇 Protopanaxatriol HPLC≥98% 19666-76-3 人参二醇 Panaxadiol HPLC≥98% 32791-84-7 人参三醇 Panaxatriol HPLC≥98% 114902-16-8 刺五加皂苷B Ciwujia 酶6(抗原) Caspase-9 白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6(抗原) AD7C-NTP/NTP/AF peptide 神经丝蛋白蛋白多肽抗原(人) Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10(抗原) Caspase-13 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13(抗原) CD19(B-lymphocyte Anti-gen CD19 precursor) CD19(抗原) DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase)N terminal 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗原(N端) DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗原 AEG-1 peptide AEG-1抗原 CD31 (PECAM-1) 血小板内皮细胞黏附分子-1(抗原) ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪组织分化相关蛋白抗原 Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1 免疫球蛋白结合蛋白-1 CD133 Anti-gen 造血干细胞抗原(多肽抗原) c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原) ChAT(Choline Acetyltransferase) 胆碱乙酰转移酶(抗原) ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体(抗原) C-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽) 小鼠杂交瘤细胞;BB7.2CR (Calretinin) 钙结合蛋白(抗原) CRP (C-reactive protin) C-反应蛋白(抗原) ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3) 腺苷受体A3抗原 Integrin AlphaV (Integrin alpha V 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |