细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;F4/80 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 可产生抗小鼠巨噬细胞的单克隆抗体Mac-2 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Jujuboside D 472-15-1 白桦脂酸 白桦酯酸 Betulinic acid HPLC≥98% 80681-45-4 升麻素苷 升麻苷 Prim-O-glucosylcimifugin HPLC≥98% 37921-38-3 升麻素 Cimifugin HPLC≥98% 61276-17-3 类叶升麻苷 麦角甾苷;毛蕊花糖苷 Acteoside HPLC≥98% 61303-13-7 异类叶升麻苷 异麦角甾苷;异毛蕊花糖苷 Isoacteoside HPLC≥98% 82854-37-3 松果菊苷 海胆苷 Echinacoside HPLC≥98% 84272-85-5 5-O-甲基维斯阿米醇苷 5-O-Methylvisammioside HPLC≥98% 470-17-7 异土木香内酯 异阿兰内酯 Isoalantolactone HPLC≥98% 960383-96-4 盐酸药根碱 Jatrorrhizine Hydrochloride HPLC≥98% 34316-15-9 白屈菜红碱 白屈菜赤碱 Chelerythrine HPLC≥98% 2447-54-3 血根碱 Sanguinarine HPLC≥98% 13063-04-2 氯化两面针碱 Nitidine chloride HPLC≥98% 26833-87-4 高三尖杉酯碱 Homoharringtonine HPLC≥98% 87-52-5 芦竹碱 克胺; 3-二甲氨基甲基吲哚; 格胺 Gramine HPLC≥98% 50-55-5 利血平 蛇根草素; 蛇根碱; 血安平; 利舍平 Reserpine HPLC≥98% 480-40-0 白杨素 柯因; 5,7-白杨黄素; 金黃酮 Chrysin HPLC≥98% 65995-64-4 石榴皮鞣素 安石榴磷 Punicalin HPLC≥98% 2114454 喜树碱 Camptothecine HPLC≥98% 续随二萜醇 34420-19-4 千金子二萜醇 Lathyrol 507-70-0 龙脑 天然龙脑,内有三个成份 FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 载脂蛋白-a1 Agrin peptide 聚集蛋白抗原 Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管组织血管紧张素Ⅱ1型受体抗原 FasL(抗原) Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烃受体抗原 Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原) FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素结合生长因子( 酸性成纤维细胞生长因子)(多肽片断抗原) ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相关基因(抗原) fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又称:纤维介素蛋白;前凝血素) FLIP S/L peptide 凋亡调节基因之一(多肽抗原) FoxP3 叉头蛋白3-T细胞转录因子(多肽抗原) GAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷氨酸脱羧酶-65(抗原) GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生长相关蛋白-43(抗原) Gastrin 胃泌素(抗原) AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗原 GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 胶质纤维酸性蛋白(抗原) 小鼠杂交瘤细胞;F4/80AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗原 MMP-1(matrix metalloproteinases-1) 基质金属蛋白酶-1(抗原) MMP-2 基质金属蛋白酶-2(多肽抗原) beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |