细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;CBA1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 可产生抗人绒毛膜促性腺激素α-HCG的单克隆抗体。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF TLC≥99% "分子式: C30H52O3 分子量: 460" (R型)原人参二醇 20(R)Protopanaxdiol HPLC≥98% 2182-14-1 文多灵 长春多灵; 长春花朵灵; 长春刀灵 Vindoline HPLC≥98% 2468-21-5 长春质碱 Catharanthine HPLC≥98% 961-29-5 异甘草素 Isoliquiritigenin HPLC≥98% 39524-08-8 川续断皂苷VI 木通皂苷D Asperosaponin Ⅵ HPLC≥98% 578-74-5 芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 大波斯菊苷;芹菜素-7-葡萄糖苷 Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside HPLC≥98% "分子式:C54H88O23 分子量:1104" 辽东楤木皂苷V Araloside V HPLC≥98% "分子式:C60H98O28 分子量:1266" 辽东楤木皂苷X Araloside X HPLC≥98% "分子式: C54H88O24 分子量: 1120" 辽东楤木皂苷VII Araloside VII HPLC≥98% 4046-02-0 阿魏酸乙酯 Ethyl ferulate HPLC≥98% 58-55-9 茶碱 Theophylline HPLC≥98% 50-99-7 D(十)-无水葡萄糖 D-无水葡萄糖; 葡萄糖 D(+)-Glucose HPLC≥98% 134418-28-3 脱水穿心莲内酯 穿心莲丁素 Dehydroandrographolide HPLC≥98% 491-50-9 槲皮素-7-O-葡萄糖苷 槲皮素-7-葡萄糖苷;槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷 Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside HPLC≥98% 20126-59-4 香叶木素-7-O-葡萄糖苷 香叶木素-7-葡萄糖苷;香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷 Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside HPLC≥98% 604-80-8 水仙苷 水仙甙;异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷;异鼠李素-3-O-芸香糖苷 Narcissoside HPLC≥98% 39011-90-0 芍药内酯苷 Alibiflorin HPLC≥96.50% 491-54-3 素 山柰素 Kaempferide HPLC≥98% 6035-49-0 白蜡树素 涔皮素; 二甲基白蜡树亭 Dimethylfraxetin HPLC≥98% 87701-68-6 环氧泽泻烯 Alismoxide HPLC≥98% 486-86-2 N-甲基野靛碱 N-甲基金雀花碱 N-Methylcytisine HPLC≥98% 40437-72-7 百蕊草素I 阿福豆苷;山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷;山柰酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷 Kaempferol-3-O-glucorhamnoside HPLC≥98% 527-95-7 草质素 蜀葵苷元;蜀葵甙元;3 -B(抗原) PDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A(抗原) PDGF-R-B 血小板源性生长因子受体-B(抗原) PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽 PI3K 磷脂酰肌醇激酶(抗原) BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形态发生蛋白4(抗原) PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盘生长因子(多肽抗原) PLGF (Placenta growth factor) 胎盘生长因子(多肽抗原) PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 人胎盘生长因子(多肽抗原) PP-1 蛋白磷酸酯酶-1(抗原) BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受体1A抗原 PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor) D型-过氧化酶活化增生受体(多肽) PP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白质磷酸酶-2A(抗原) BOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B细胞特异性转录因子抗原 PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亚单位(抗原) PR (Progestogerone receptor) 孕激素受体(抗原) PS-1(NT),Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原) PS-1,Presennillin-1(CT) 早老素蛋白-1(S182) BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat) 乳癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠) BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(human) 乳癌易感基因1抗原(人) PSD-95 突触后密度蛋白95(抗原) 小鼠杂交瘤细胞;CBA1BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 乳癌易感基因2抗原 PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(抗原) RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 维甲酸受体-α 多肽 glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella v 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |