细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;Lsc-035 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 可产生抗人小细胞肺癌的单克隆抗体。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Licochalcone A HPLC≥98% 58749-23-8 甘草查尔酮B Licochalcone B HPLC≥98% 144506-14-9 甘草查尔酮C Licochalcone C HPLC≥98% 莲心碱高氯酸盐 Liensinine Perchlorate HPLC≥98% 2586-96-1 莲心碱 Liensinine HPLC≥98% 78-70-6 芳樟醇 Linalool HPLC≥98% 6681-18-1 木兰花碱 Magnoflorine chloride HPLC≥98% 11013-97-1 甲基橙皮苷 Methyl hesperidin HPLC≥98% 54522-52-0 甲基原薯蓣皂苷 Methyl protodioscin HPLC≥98% 丹参酚酸B甲酯 Monomethyl lithospermate B HPLC≥98% 62596-29-6 桑辛素 Morusin HPLC≥98% 102841-42-9 桑皮苷A Mulberroside A HPLC≥98% 102841-43-0 桑皮苷C Mulberroside C HPLC≥98% 551-08-6 丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide HPLC≥98% 2292-16-2 甲基莲心碱 Neferine HPLC≥98% 27215-14-1 新穿心莲内酯 Neoandrographolide HPLC≥98% 39011-91-1 氧化芍药苷 Oxypaeoniflorin HPLC≥98% 29070-92-6 茯苓酸 Pachymic acid HPLC≥98% 55954-61-5 伪金丝桃素 假金丝桃素 Pseudohypericin HPLC≥98% 113443-70-2 大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside HPLC≥98% 80651-76-9 桑根酮C Sanggenone C HPLC≥98% 62006-39-7 洋川芎内酯A Senkyunolide A HPLC≥98% 94596-27-7 洋川芎内酯H Senkyunolide H HPLC≥98% 94596-28-8 洋川芎内酯I Senkyunolide I HPLC≥98% 641-12-3 番泻苷元A 番泻甙元A Sennidin A HPLC 因子受体4抗原 CCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋化因子受体6抗原 CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide 细胞表面趋化因子受体6抗原 CCR-7(CC chemokine receptor 7) CC趋化因子受体7(多肽) CXCL10/IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗原 VEGF(Vascular endothelial growth factor) 血管内皮生长因子(多肽抗原) CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase) CD10抗原 ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1) ZCWCC1抗原 CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转化生长因子β受体抗原 CD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原 CD146/MCAM 黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗原 ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原 CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/内毒素受体抗原 CD28 CD28抗原 CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白细胞粘附分子抗原 CD177/NB1 peptide 嗜中性粒细胞抗原CD177抗原 CD24 CD24抗原 CD24 CD24抗原 CD2AP (CD2-associated protein) 白细胞分化抗原CD2AP CD33 peptide(human) CD33抗原(人) CD33/Siglec-3(mouse ret) CD33抗原(大、小鼠) CD34 CD34抗原(细胞表面的唾液粘蛋白) 小鼠杂交瘤细胞;Lsc-035CD38(mouse, rat) CD38多肽(小鼠、大鼠) CD38(human) CD38抗原(人) CD36 CD36(多肽) CD7 CD7抗原 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |