细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;CY12.14 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 可产生抗SAP的单克隆抗体。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS 传代方法 1:2。3天内可长满。 传代情况 PN 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 洋玉兰碱 Magnoflorine iodide HPLC≥98% 136997-64-3 (-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside HPLC≥98% 1,2-二氯丙烷标准品 : 78-87-5 250mg 1,3-二氯丙烯 标准品 : 542-75-6 250mg 1-萘乙酸 86-87-3 1g 2-(1-萘)乙酰胺 标准品 :86-86-2 1g 2,2-DPA 茅草枯 标准品 :75-99-0 250mg 2,4,5-T 2,4,5-涕标准品 : 93-76-5 250mg 2,4-D 2,4-滴 标准品 :94-75-7 250mg 2,4-DB 2,4-滴丁酸 标准品 :94-82-6 250mg 2,6-DIFLUOROBENZOIC ACID 2,6-二氟苯甲酸 标准品 :385-00-2 250mg 2-乙酰氨基-5-硝基噻唑 标准品 :140-40-9 100mg 2-苯基苯酚 标准品 :90-43-7 250mg 对氯苯氧乙酸 标准品 :122-88-3 250mg 阿维菌素 标准品 :71751-41-2 100mg 乙酰磷 标准品 :30560-19-1 250mg 灭螨醌 标准品 :57960-19-7 1ml 吡虫清 标准品 :160430-64-8 100MG 乙草胺 标准品 :34256-82-1 100mg 苯并噻二唑(简称BTH) 标准品 :135158-54-2 0.1g 三氟羧草醚标准品 : 50594-66-6 250MG 氟丙菊酯 标准品 :101007-06-1 100MG 阿克洛胺 标准品 :3011-89-0 100MG 甲草胺 标准品 :15972-60-8 250MG 棉铃威标准品 : 83130-01-2 1ML 标准品 :116-06-3 100MG 涕灭砜威 标准品 :1646-88-4 10mg in Ampule 标准品 : 309-00-2 250MG 标准品 :60-57-1 100MG 丙烯菊酯 标准品 :584-79-2 100MG 草毒死标准品 : 93-71-0 100MG 枯杀达 标准品 :55635-13-7 250MG 烯丙孕素 标准品 :850-52-2 100MG 莠灭净 标准品 :834-12-8 250MG 艾维激素 标准品 :55720-26-8 5mg 双甲脒 标准品 :33089-61-1 250MG 氨苄青霉素 标准品 :7177-48-2 250MG 氨丙啉 标准品 :137-88-2 250MG CGA(Chromogranin A) 嗜铬粒素A抗原 CGB(Chromogranin B) 嗜铬粒素B抗原 ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗原 ChRM3 peptide 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原 CK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽) CK18 peptide 细胞角蛋白18多肽抗原 CK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18抗原(C端) CK14/17/42/10 peptide 细胞角蛋白14抗原 CK16(Cytokeratin 16) 细胞角蛋白16抗原 CK17(Cytokeratin 17) 细胞角蛋白17抗原 CK19 细胞角蛋白19多肽抗原 CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 细胞角蛋白1/8/19抗原 CK2(casein kinase 2) 细胞角蛋白2抗原 CK5(Cytokeratin 5) 细胞角蛋白5抗原 CK7(Cytokeratin 7)human 细胞角蛋白7抗原 CK8(Cytokeratin 8) 细胞角蛋白8(多肽) CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原 CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 钙激活氯离子通道4抗原 C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase) c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗原 c-Myc tag c-Myc tag标签多肽 AU5 tag AU5 tag标签抗原 AU1 tag peptide AU1 tag标签多肽 Glu-Glu Tag peptide Glu-Glu Tag多肽蛋白 CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗原 CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型钠尿肽抗原 CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) 睫状神经营养因子抗原 factor V(Vcoagulation factor) 凝血因子5抗体 Collagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原) Collagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原) Collagen IV (Anti-Collagen Type IV ) IV型胶原抗体(Collagen Ⅳ Ⅳ 型胶原) Collagen I(Anti-Collagen Type I) I型胶原蛋白 Collagen V (Anti--Collagen Type V ) Ⅴ型胶原(多肽) CLDN1(Claudin 1) 紧密连接蛋白1抗原 Claudin-11 peptide 少突胶质细胞跨膜蛋白抗原 CLDN1(Claudin 1)C-term 紧密连接蛋白1抗原(C端) COX-1 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-1) 前列腺素氧化环化酶1抗原 CPT1A peptide 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A多肽抗原 CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2) 二氢嘧啶酶样2CRMP2抗原 小鼠杂交瘤细胞;CY12.14CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor) 降钙素受体样蛋白抗原 cRaf/Raf1(c-raf 1) cRaf/Raf1抗原 MEK1/MAPKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗体(N-端) CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促肾上腺皮 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |